流式细胞术检测大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能方法探讨

发布时间：2017-09-25 17:03

  本文关键词：流式细胞术检测大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能方法探讨

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【摘要】：目的:比较不同实验条件对检测肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响,为流式细胞术检测肺泡巨噬细胞吞噬功能筛选快速、灵敏、稳定的实验方法。方法:支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞,将肺泡巨噬细胞分别与转红色荧光蛋白基因质粒细菌〔E.coliDH5α(pJZ402rfp)〕及未转质粒细菌(E.coliDH5α)孵育,并选择〔E.coliDH5α(pJZ402rfp)〕与肺泡巨噬细胞按不同的细菌与细胞比例(50:1、100:1、200:1)、孵育时间(30min、60min、120min、180min)及培养溶液(PBS、Hanks、无血清1640)进行孵育,流式细胞仪检测肺泡巨噬细胞的吞噬功能。结果:E.coliDH5α(pJZ402rfp)具有稳定的红色荧光,用E.coliDH5α(pJZ402rfp)检测肺泡巨噬细胞的吞噬功能比用E.coliDH5α获得更多的参数。肺泡巨噬细胞的吞噬率随着细菌与细胞比例的增大而增加,而吞噬指数在细菌与细胞比例为100:1时为最高(P0.05);肺泡巨噬细胞的吞噬率从30分钟到120分钟变化不大,但到180分钟吞噬率有明星的降低(P0.05),吞噬指数则在60分钟时最高,有显著差异(P0.05);Hanks液组肺泡巨噬细胞的吞噬率及吞噬指数显著高于PBS组及1640组(P0.05)。结论:在室温(260C)以肺泡巨噬细胞与E.coliDH5α(pJZ402rfp)比为1:100的Hanks液中孵育1小时,是流式细胞术检测肺泡巨噬细胞吞噬功能的快速、灵敏、稳定的实验方法。
【作者单位】： 苏州大学医学部;上海市城市环境气象中心;
【关键词】： 转红色荧光蛋白基因质粒细菌 流式细胞术 肺泡巨噬细胞
【基金】：上海市科学技术委员会“气象与健康”课题,课题号:11DZ226900
【分类号】：R363
【正文快照】： 呼吸系统是环境和职业危害侵入机体的主要途径之一,肺泡巨噬细胞作为呼吸系统防御机能的第一道屏障,它具有摄取、处理、加工清除外来异物的功能,但在发挥防御功能的同时也受到损害,故常用肺泡巨噬细胞来评价外源性毒物的毒性并把肺泡巨噬细胞受损作为反映肺实质损伤的标志之

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本文编号：918504