致人体呼吸道感染的似棘阿米巴形态学和分子生物学鉴定

发布时间：2017-12-01 16:16

  本文关键词：致人体呼吸道感染的似棘阿米巴形态学和分子生物学鉴定

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【摘要】：目的鉴定某反复咳嗽患者痰液样本中形态学似棘阿米巴的寄生虫种属。方法分离患者痰液中原虫进行体外培养,显微镜观察原虫滋养体和包囊形态,并提取原虫DNA,采用阿米巴科18S rRNA通用引物Ami6F1和Ami9R、棘阿米巴属18S rRNA通用引物JDP1和JDP2、葛氏棘阿米巴(Acanthamoeba griffini)S-7ATCC 18S rRNA全长序列引物AacGF和AacGR进行PCR扩增鉴定。以样本的18S rRNA基因为分子标志,与GenBank中各棘阿米巴序列进行同源性分析,筛选相关物种序列,采用最大似然法构建系统进化树,分析亲缘关系。结果镜下可见,患者痰样中的滋养体具有棘阿米巴特征性的棘状伪足凸起,并呈无规则的变形虫状;包囊为两层膜结构,内膜具有棘阿米巴特征性的星状突起。PCR检测结果显示,采用3组引物分别扩增出830、479和1 954 bp的条带,与预期片段大小一致。经BLAST比对后,3个扩增产物序列与棘阿米巴S-7 ATCC相似度分别达99%、99%、100%。系统进化树结果显示,样本棘阿米巴与引起角膜炎的卡氏棘阿米巴(A.castellanii)、多噬棘阿米巴(A.polyphaga)、柯氏棘阿米巴(A.cullbertsoni)和条脊棘阿米巴(A.rhysodes)同源性较高,分别为91.4%、99.6%、94.5%和91.8%。结论该呼吸道感染患者痰液样本中的寄生虫鉴定为葛氏棘阿米巴。
【作者单位】： 上海海洋大学海洋生物和神经科学研究所;第二军医大学病原生物学教研室;
【基金】：卫生行业科研专项经费资助项目(No.201202019) 国家自然科学基金(No.81141085)~~
【分类号】：R531.1
【正文快照】： 棘阿米巴(Acanthamoeba spp.)是一种自由生活的原生动物,最早由Castellani发现存在于隐球菌的培养基中[1]。棘阿米巴属的分类在1931年由Volkonsky建立,至1988年,棘阿米巴的明确分类地位由Pussard和Pons完成[2]。棘阿米巴属原生动物界(Protisa),肉足鞭毛虫门(Sarcomastigophora

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1 高敏;罗时运;肖扬;李然;王智群;孙旭光;;棘阿米巴对体外培养人角膜上皮细胞的损伤作用[J];眼科新进展;2009年04期

2 郑善子;;棘阿米巴引起的肉芽肿性阿米巴脑炎研究进展[J];延边大学医学学报;2005年04期

3 易有云;致病的自由生活阿米巴[J];寄生虫学与寄生虫病杂志;1984年01期

4 郭睿;刘铁军;邓奎品;;原发性棘阿米巴肉芽肿性阿米巴脑炎误诊1例分析[J];中国医学影像技术;2008年06期

5 ;[J];;年期

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1 吴楠;抗真菌药与抗生素联用对棘阿米巴的杀伤作用[D];延边大学;2014年

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