应用快速孵育法优化酶联免疫吸附实验过程探讨——以乙型肝炎病毒表面抗原检测为例
本文关键词：应用快速孵育法优化酶联免疫吸附实验过程探讨——以乙型肝炎病毒表面抗原检测为例 出处：《标记免疫分析与临床》2016年09期 论文类型：期刊论文
【摘要】：目的利用快速孵育法优化酶联免疫吸附实验操作流程,通过缩短孵育时间,以提高工作效率。方法收集化学发光法定量检测乙肝表面抗原阳性高值样本30例、阳性中值样本30例、阳性临界值样本30例、阴性样本30例,使用ELISA试剂盒说明书推荐方法和快速孵育法同时进行检测,比较检测结果相关性。结果使用酶标板孵育器将孵育时间缩短至原来的1/2、1/3时,ELISA试剂盒说明书推荐方法、快速孵育法与化学发光法检测结果符合率100%;当孵育时间缩短至原来时间的1/4时,两种方法与化学发光法阴性、高值和中值样本检测结果符合率100%;临界值样本检测时,ELISA试剂盒说明书推荐方法与化学发光法检测结果符合率100%,快速孵育法与化学发光法结果 6例不一致,检测结果符合率80%。结论通过实验证实,酶联免疫吸附实验时,快速孵育法可满足临床检测,可将孵育时间缩短至原试剂盒推荐时间的1/3或1/2,可提高工作效率。
[Abstract]:Objective to optimize the process of enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) by rapid incubation, and to improve the efficiency by shortening the incubation time. Methods chemiluminescence method for quantitative detection of hepatitis B surface antigen positive samples in 30 cases, 30 cases of positive samples and the positive critical value of sample in 30 cases, 30 cases of negative samples, using ELISA kit recommended method and fast incubation method were detected at the same time, compared the detection results of correlation. The results of using microplate incubator the incubation time is shortened to 1/2, 1/3, ELISA kit method, recommended incubation fast chemiluminescence method and chemical detection results are consistent with the rate of 100%; when the incubation time is shortened to the time of 1/4, two kinds of method and chemiluminescence method, high negative mean and the sample test results coincidence rate was 100%; the critical value of sample detection, ELISA kit recommended method and chemical test results chemiluminescence coincidence rate was 100%, rapid incubation method and chemiluminescence detection results of the 6 cases is not the same, the coincidence rate of 80%. Conclusion it is confirmed by experiments that the rapid incubation method can meet clinical detection in enzyme linked immunosorbent assay, and shorten incubation time to 1/3 or 1/2 recommended by the original kit, which can improve work efficiency.
【作者单位】： 首都医科大学附属北京天坛医院临床医学研究实验室;首都医科大学附属北京天坛医院;首都医科大学附属北京天坛医院检验科;
【基金】：家自然科学基金(81572474) 首都医科大学校长基金(2015JYY80) 北京市中医药科技发展资金项目(JJ2015-14)
【分类号】：R446.6;R512.62
【正文快照】： 酶联免疫吸附实验(enzyme linkedimmunosorbent assay,ELISA)是临床实验室中最常使用的方法之一,是一种以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合的一种实验技术。ELISA技术操作简易、成本低、数据可靠,在临床和科研中均有比较广泛的应用[1
【参考文献】
相关期刊论文 前2条
1 李晓霞;迟伟群;姚玉虹;于晓斐;江跃红;许铁;姜晓峰;;温湿度对高通量ELISA检测系统检测梅毒螺旋体抗体影响的分析[J];标记免疫分析与临床;2015年01期
2 马小燕;张弘;;ELISA不同孵育条件HBsAg检测结果的比较[J];广西医科大学学报;2010年03期
【共引文献】
相关期刊论文 前3条
1 刘丽;何露;孔凡虹;曹敬丽;贾子琪;刘文松;许震;王雅杰;;应用快速孵育法优化酶联免疫吸附实验过程探讨——以乙型肝炎病毒表面抗原检测为例[J];标记免疫分析与临床;2016年09期
2 刘婷;;3种不同实验条件的ELISA法检测HBsAg的比较研究[J];中外医学研究;2012年07期
3 刘文阁;;对临床常用酶联免疫吸附试验技术类型的评价与分析[J];中国医药导报;2011年04期
【二级参考文献】
相关期刊论文 前4条
1 陈怀霞;;温度对ELISA检测法的影响[J];中国社区医师(医学专业半月刊);2009年21期
2 毛丽萍,倪晓蓉;南通地区乙型肝炎病人中低水平HBsAg测定及其临床意义[J];江西医学检验;2003年04期
3 李金明,王露楠,徐锡霞,邓巍;室内质量控制对乙型肝炎表面抗原测定准确度的影响[J];中华检验医学杂志;2001年04期
4 许斌，韩光宇，程梅;血液HBsAg、抗HCV复检中应采用不同试剂和设置低限灰区[J];临床检验杂志;1998年06期
【相似文献】
相关期刊论文 前10条
1 向荣，易宁育，，夏宗勤;用多点放射配基结合分析法求解受体参数所需孵育时间的研究[J];核技术;1994年11期
2 陈彦红,王廷华,朱兴宝;Ⅰ抗孵育时间对免疫组织化学实验结果的影响(摘要)[J];昆明医学院学报;2000年01期
3 周惠琴,赵胜,严茹红;孵育时间不同对嗜麦芽窄食单胞菌药敏结果的影响[J];临床检验杂志;2005年04期
4 罗伟,王廷华,赵匡彦;Ⅰ抗孵育时间对免疫组织化学实验结果的影响[J];四川解剖学杂志;2004年02期
5 张琴;徐望明;徐岚;胡静;;精卵孵育时间对体外受精-胚胎移植结局的影响[J];现代预防医学;2010年06期
6 徐鸿毅;罗清炳;董毅飞;陈娟;江胜芳;张鑫;张昌军;;缩短精子孵育时间对体外受精-胚胎移植结局的影响[J];湖北医药学院学报;2012年01期
7 郑敏文;宦怡;徐键;李家一;程康;赵力;尹涛;赵海涛;葛雅丽;;超顺磁性氧化铁纳米颗粒标记兔骨髓间充质干细胞的孵育时间优选[J];实用放射学杂志;2006年08期
8 刘婉华;刘健;刁振琦;王杰芳;;光敏剂对肿瘤细胞损伤效应与孵育时间关系的拉曼光谱分析[J];光谱实验室;2010年05期
9 江楠;王启钊;;缩短精卵共孵育时间对人类体外受精结局的影响[J];中国优生与遗传杂志;2011年03期
10 刘凡光,戴维德,顾瑛,王雷,李晓松,曾晶;细胞种类及孵育时间对血卟啉单甲醚在细胞内分布的影响[J];中国激光医学杂志;2005年03期
相关会议论文 前3条
1 宋斌斌;沈敏娜;郭玮;潘柏申;;孵育时间对HBsAg ELISA检测的影响[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
2 戴维德;刘凡光;顾瑛;王雷;李晓松;曾晶;;细胞种类及孵育时间对血卟啉单甲醚在细胞内分布的影响[A];大珩先生九十华诞文集暨中国光学学会2004年学术大会论文集[C];2004年
3 宋岳强;邱乒乒;沙艳伟;陈春华;王旭;黄平;李萍;;IVF加精前精子孵育时间对卵母细胞受精率及胚胎发育的影响[A];中华医学会第十次全国妇产科学术会议妇科内分泌会场（妇科内分泌学组、绝经学组、计划生育学组）论文汇编[C];2012年
相关硕士学位论文 前1条
1 刘佳;1α，25-二羟维生素D_3对ICP患者PBMC分泌的IFN-γ和IL-10水平的影响[D];中南大学;2008年
本文编号：1347746
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/chuanranbingxuelunwen/1347746.html
