HIV感染过程中DNT细胞的动态变化研究

发布时间：2018-03-07 16:39

本文选题：HIV-1感染　切入点：艾滋病　出处：《川北医学院》2013年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：背景：艾滋病是世界上最严重的传染病之一，已成为全球极大的经济负担和严重的社会问题。HIV难以控制的原因之一为其直接破坏人体免疫系统，使免疫系统不能有效抵抗及清除病毒感染。在HIV与人体免疫系统的复杂作用中寻求突破，已成为国际艾滋病研究的热点问题。CD4~+细胞的大量丢失，是HIV感染发病机制的主要原因之一，使得机体免疫系统不具有足够数量的辅助性T细胞去抵抗机会性感染和肿瘤的发生。HIV感染的第二个免疫发病机制是过度的免疫活化，实际上大量研究表明调节性T细胞（CD4+CD25+Foxp3+T细胞,Treg细胞），它能够抑制过度的免疫活化，对机体发挥有利的作用，但是最新研究还表明在HIV感染中Treg细胞本身就要被HIV-1病毒感染和杀伤，因为Treg细胞也表达CD4+分子，它是HIV-1的潜在易感细胞，因此寻找到一种既不表达CD4~+分子，又具有调节性T细胞和辅助性T细胞的功能，还能补偿低水平的CD4+细胞的细胞亚群，将为艾滋病的预防与治疗提供新的思路，DNT细胞就是这样的一群细胞，它不表达CD4~+分子也不表达CD8~+分子，被称为双阴性T细胞（αβ-TCR~+CD3~+CD4~-CD8~-T细胞），它具有调节性T细胞的功能已经在自身免疫和移植的小鼠模型中得到了证实，最近一项研究表明SIV感染白眉猴后，DNT细胞能够补偿CD4~+辅助性T细胞，使得感染SIV的白眉猴保持10年不发病。但到目前为止DNT细胞在HIV感染中作用机制尚不清楚。目前尚无中国HIV感染者DNT细胞作用及机制研究，本研究首次对中国不同疾病进展阶段HIV感染者DNT细胞与CD4~+计数、病毒载量的相关性研究，初步探讨DNT细胞与HIV感染疾病进展的关系。目的： (1)探讨HIV感染后疾病进展明显不同的两组病人DNT细胞动态变化情况。 (2)分析DNT细胞与CD4~+细胞计数变化的关系。 (3)探讨DNT细胞与血浆HIV RNA载量(VL)之间的关系。 (4)分析DNT细胞与HIV疾病进展的关系，近一步探讨DNT细胞在HIV感染中的作用。方法：选择选取北京佑安医院规律随访的AIDS患者240例，根据其病程进展分为两组,一组为1年内CD4~+细胞计数始终500个/ul（CD4high组）,共157例；另一组为1年内其CD4~+细胞计数进展到250个/ul（CD4low组），共83例，采集入组患者感染后1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、12个月全血，留取血浆、分离PBMCs；同时选取健康对照组89例。采用流式细胞技术测定CD4~+、CD8~+及DNT细胞绝对值及比值，用罗氏病毒载量试剂盒检测AIDS患者病毒载量，采用SPSS16.0软件分析数据特点。结果： (1) DNT细胞在CD4low组（CD4+250个/ul，在1年的时间内CD4~+下降到小于250个/ul）、CD4high组（CD4+500个/ul，在1年的时间内CD4~+始终保持到大于500个/ul）及健康对照组中的分布情况。通过流式细胞技术检测外周血PBMC中DNT细胞水平发现DNT细胞占CD3~+细胞的百分比在CD4high组、健康对照组和CD4low组中依次增高，CD4low组中明显高于CD4high组和健康对照组，差异均具有统计学意义（6.96±0.32%VS5.47±0.21%t=3.989，，p=0.0001；6.96±0.32%VS5.89±0.289%t=2.490，p=0.013），DNT细胞占CD3+细胞的百分比在健康对照组中和CD4high组相比较差异无统计学意义（t=1.169，p=0.243），DNT细胞绝对值在CD4low组和CD4high组间差异无统计学意义（95.04±5.90个/ul VS96.37±3.46个/ul t=0.207，p=0.836）, DNT细胞绝对值在CD4low组和健康对照组间比较差异也无统计学意义（95.04±5.90个/ul VS93.82±4.51个/ul t=0.166，p=0.868），DNT细胞绝对值在CD4high组和健康对照组间比较差异无统计学意义（t=0.446，p=0.655）。 (2) DNT细胞与CD4~+细胞的相关性 HIV-1感染中DNT细胞占CD3~+细胞的百分比和CD4~+细胞计数呈负相关（R=-0.372,P=0.0002）, DNT细胞绝对值和CD4~+细胞计数无相关性（R=-0.186,P=0.053）。而健康对照组中DNT细胞占CD3~+细胞的百分比和DNT细胞绝对值与CD4~+细胞计数均无相关性（R=0.073,P=0.48;R=0.208,P=0.063）。 (3) DNT细胞与病毒载量的相关性 DNT细胞占CD3~+的百分比及DNT细胞绝对值在病毒载量Log10vl4.5(copies/ml)组中均明显高于病毒载量Log10vl4.5(copies/ml)组,差异均有统计学意义（6.815±0.33%VS5.679±0.255%,t=2.697，p=0.0075；113.6±6.411个/ul VS92.50±4.074个/ul，t=2.907，p=0.004）。（4）CD4high组和CD4low组各随访点DNT细胞比值、DNT细胞绝对值，CD4+细胞计数，病毒载量的动态变化情况比较 DNT细胞占CD3~+细胞的百分比在1年的时间里，CD4low组在各个随访点的值均高于CD4high组。然而DNT细胞绝对值在随访的1年的时间里，各个随访点的值并不均高于CD4high组，在第3个月和第6个月的随访点中，CD4low组的DNT细胞绝对值低于CD4high组。CD4low和CD4high两组患者均出现CD4~+细胞计数先急剧下降，3个月时CD4~+细胞计数下降到最低值，接着CD4~+细胞计数上升，到达一定阶段再下降，最后不变的一个变化规律。CD4high和CD4low这两组患者病毒载量在随访的1年时间里CD4low组在各个随访点的值均高于CD4high组，并且它们还具有一个共同的特征：病毒载量先急剧上升，到达3个月时病毒载量达到最高，4月、5月、6月病毒载量依次下降，到达6月时下降到最低，然后随着疾病的进程，到12月时病毒载量再次升高。结论：（1）CD4high组、健康对照组和CD4low组DNT细胞比值依次升高，提示DNT细胞比值与HIV感染疾病进展明显相关。（2）CD4high组和健康对照组DNT细胞比值明显低于CD4low组，提示低水平的DNT细胞对HIV感染后疾病不进展具有保护作用。（3） HIV-1感染中DNT细胞比值和CD4+细胞计数呈负相关，DNT细胞比值在病毒载量高组患者中明显高于病毒载量低组患者，提示DNT细胞与疾病进展负相关。
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【学位授予单位】：川北医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R512.91

【参考文献】