念珠菌血症临床分析及病原基因芯片检测方法的研究

发布时间：2018-06-09 17:48

  本文选题：念珠菌血症 + 病原学　； 参考：《复旦大学》2014年硕士论文

【摘要】：念珠菌血症是由念珠菌所致的血流感染。近年来,随着广谱抗菌药物的大量应用、免疫抑制人群的增加及有创诊断和治疗措施的广泛开展,其发病率日益增高,念珠菌已位居医院内所有血流感染病原菌的第4位。念珠菌血症主要由白念珠菌引起,然而近年来非白念珠菌比例逐渐升高,且近来发现部分非白念珠菌感染的致病菌具有对常规抗真菌药物的天然耐受性,给临床治疗增加了更大的挑战。念珠菌血症预后受到多种因素影响,包括合理抗真菌治疗等。念珠菌血症的临床诊断比较困难,目前主要依赖于常规的分离培养方法,但其周期长且阳性率低,而真菌特异性抗原、抗体和代谢产物的血清学方法则存在敏感性及特异性低的缺陷。基因芯片技术(又名DNA芯片、DNA微阵列)是分子杂交基础上衍生的一项检测技术,可快速将致病菌鉴定种,能进行大批量基因检测,从而提高诊断效率。第一部分 念珠菌血症临床分析本部分检索、收集2007年1月1日至2012年12月31日期间复旦大学附属华山医院所有血培养念珠菌阳性的住院患者病历资料,回顾患者病历记录,整理性别、年龄、科室、基础疾病、致病菌种等基本资料,记录临床表现、治疗和转归。上述资料的统计结果显示,念珠菌血症病原菌种包括白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌等,常见基础疾病包括实体肿瘤,胃肠道手术史、糖尿病等。留置深静脉导管、合理抗真菌治疗为影响预后的独立因素。第二部分 念珠菌血症病原基因芯片检测方法的建立本部分建立了基因芯片技术鉴定临床常见念珠菌的分子生物学方法。PCR扩增临床常见念珠菌DNA所用的通用引物是根据真菌的2个18S rDNA保守区序列而设计,用此引物扩增念珠菌属DNA,并通过在PCR引物上标记荧光基团,使扩增产物携带可被检测荧光信号。根据18S rDNA保守序列之间可变区设计合成了6种临床常见致病念珠菌(白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、季也蒙念珠菌)的特异性探针。并同时设计新型隐球菌特异探针、曲霉通用探针以检测血培养报警标本中可能存在的真菌性病原。将所有探针固定于同一张芯片片基上,与标记荧光的PCR产物进行杂交,可将6种常见致病念珠菌鉴定到种的水平。结果显示,此6种念珠菌探针不与细菌和人类DNA分子发生非特异杂交,此方法具有高度的特异性。杂交的检测下限为100个真菌细胞/PCR反应,具有很好的敏感性。第三部分 念珠菌血症病原基因芯片检测方法的临床应用收集2011年3月至2012年3月复旦大学附属华山医院检验科血培养机器报警阳性的血液样本440例,其中真菌阳性22例。采用本研究建立的基因芯片检测方法对440例血液标本进行检测分析,共检出21例念珠菌,1例新型隐球菌,与常规培养、鉴定结果完全相符。因此基因芯片检测技术用于临床样本与传统培养方法符合率高。而该方法耗时短,从DNA提取至杂交结果仅需数小时,可用于临床报警血标本中念珠菌的检测。
[Abstract]:In recent years , with the extensive application of broad - spectrum antibacterial drugs , the increase of immune suppression population and the extensive development of invasive diagnostic and therapeutic measures , the incidence of candidaemia is increasing . The clinical diagnosis of Candida albicans has been affected by various factors , including reasonable antifungal therapy . A new type Cryptococcus neoformans probe was designed to detect the possible fungal pathogens in blood culture and alarm samples .
【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R519.3

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张华;;医院内获得性念珠菌血症的危险因素和临床分析[J];医药论坛杂志;2010年24期

2 于凯江;郑俊波;;重症患者念珠菌血症的诊治[J];中国感染与化疗杂志;2011年02期

3 张斌;王炜;刘凤奎;王国兴;孙雪莲;杨立佩;;成人念珠菌血症33例临床特点分析[J];临床和实验医学杂志;2012年15期

4 徐晓峰,刘双,张艳艳,高伟,李京明;念珠菌菌血症22例临床分析[J];中华内科杂志;2005年03期

5 熊旭东;谢芳;严慧萍;王倩;彭文波;;念珠菌血症34例临床分析[J];中国实用内科杂志;2007年19期

6 张丽雁;王莉;袁丽娜;;革兰阴性杆菌败血症和念珠菌血症危险因素分析[J];中华临床医师杂志(电子版);2011年07期

7 马春芳;孔倩倩;李芳秋;蔡迁;王颖;黄梅;韩丹丹;;133例念珠菌血症临床与实验室分析[J];临床检验杂志;2013年02期

8 金益峰;赵丽燕;;医院获得性念珠菌血症的危险因素和预后相关性分析[J];现代实用医学;2013年05期

9 吴真;林东f ;肖舒心;徐晓刚;;念珠菌血症88例临床分析[J];中国感染与化疗杂志;2014年03期

10 李光辉;;念珠菌血症的诊断和抗真菌治疗[J];中国感染与化疗杂志;2011年02期

中国重要会议论文全文数据库 前5条

1 钟雪锋;孙铁英;;院内获得性念珠菌血症的回顾性临床研究[A];中华医学会呼吸病学年会——2013第十四次全国呼吸病学学术会议论文汇编[C];2013年

2 宋琳琳;陈旭岩;;念珠菌血症一例报告并文献复习[A];中华医学会急诊医学分会第十六次全国急诊医学学术年会论文集[C];2013年

3 刘涌;孙永昌;卓婕;刘晓芳;;念珠菌与细菌混合血流感染临床与危险因素分析[A];中华医学会呼吸病学年会——2013第十四次全国呼吸病学学术会议论文汇编[C];2013年

4 杨向红;孙仁华;洪军;;ICU院内念珠菌血症的临床特点及预后的多因素分析[A];2009年浙江省危重病学学术年会论文汇编[C];2009年

5 廖雪莲;康焰;;ICU念珠菌血症患者临床特点分析[A];中华医学会第五次全国重症医学大会论文汇编[C];2011年

中国重要报纸全文数据库 前1条

1 首都医大附属北京朝阳医院感染和临床微生物科 曹彬;从微观看宏观：感染学三热点[N];健康报;2008年

中国硕士学位论文全文数据库 前5条

1 吴真;念珠菌血症临床分析及病原基因芯片检测方法的研究[D];复旦大学;2014年

2 殷琪琦;重症监护病房念珠菌血症现状及危险因素分析[D];浙江大学;2008年

3 钟雪锋;院内获得性念珠菌血症的回顾性临床研究[D];北京协和医学院;2013年

4 张明;念珠菌血症的危险因素和预后分析[D];浙江大学;2014年

5 蒙永毅;ICU念珠菌血症死亡高危因素分析[D];广西医科大学;2010年

，

本文编号：2000591