赖型钩端螺旋体OmpA外膜蛋白Loa22对血管内皮细胞的毒性及对通透性的影响

发布时间：2018-07-02 10:19

  本文选题：赖型钩端螺旋体 + Loa　； 参考：《四川大学学报(医学版)》2015年02期

【摘要】：目的探讨赖型钩端螺旋体Loa22蛋白对血管内皮的毒性作用和功能影响。方法用赖型钩端螺旋体Loa22成熟肽原核重组质粒进行诱导表达带有GST标签的Loa22融合蛋白,经亲和层析柱进行纯化并获取目标蛋白,用SDS-PAGE和Western blot对目标蛋白进行检测和证实。用获得的GST-Loa22融合蛋白刺激处理培养的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)来说明钩端螺旋体外膜蛋白Loa22对血管内皮细胞的毒性作用以及对其通透性的影响。结果成功表达Loa22成熟肽原核重组质粒,通过鉴定并纯化得到Loa22融合蛋白,该蛋白随着浓度的升高能使培养的血管内皮细胞CCK-8吸光度值降低,细胞凋亡率增加,HUVEC单层通过率升高。结论Loa22融合蛋白对血管内皮细胞有明显的毒性作用,还使得HUVEC通透性增加。
[Abstract]:Objective to investigate the toxic effect and function of Loa22 protein of Leptospira leisepis on vascular endothelium. Methods Loa22 fusion protein with GST-label was induced by prokaryotic recombinant plasmid of Loa22 mature peptide of Leptospira leicata. The target protein was purified by affinity chromatography. The target protein was detected and confirmed by SDS-PAGE and Western blot. Cultured human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) were stimulated with GST-Loa22 fusion protein to demonstrate the toxicity and permeability of leptospirosis outer membrane protein Loa22. Results the recombinant plasmid of Loa22 mature peptide was successfully expressed. Loa22 fusion protein was obtained by identification and purification. With the increase of concentration, the CCK-8 absorbance of cultured vascular endothelial cells was decreased, and the cell apoptosis rate increased, and the passage rate of HUVEC monolayer increased. Conclusion Loa22 fusion protein has obvious toxic effect on vascular endothelial cells and increases the permeability of HUVEC.
【作者单位】： 四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫实验室;
【分类号】：R514.4

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：2089803