一种莱姆病螺旋体real-time PCR方法的建立及其在鼠标本检测中的应用评价（英文）

发布时间：2018-07-16 11:17

【摘要】：目的基于莱姆病螺旋体recA基因,建立一种检测鼠中莱姆病螺旋体的real-time PCR方法。方法通过GenBank分析比较莱姆病螺旋体recA基因,选择其保守序列设计MGB探针及引物并进行方法学评估。并应用建立的real-time PCR方法和nested PCR方法对收集的123份鼠标本进行检测分析。结果本研究建立的real-time PCR方法仅对莱姆病螺旋体检测阳性,其最小检出浓度为101copies/μL。标准曲线各浓度点Ct值批内、批间平均变异系数(CV)分别为1.56%和2.30%。123份鼠标本中,real-time PCR检测59例阳性,nested PCR检测43例阳性。结论新建立的real-time PCR方法具有快速、敏感和特异的优点,可用于鼠标本中莱姆病螺旋体的检测。
[Abstract]:Objective to establish a real-time PCR method for the detection of Lyme disease spirochetes in mice based on the recA gene of Lyme disease. Methods GenBank was used to analyze and compare the recA gene of Lyme disease and its conserved sequence was selected to design the MGB probe and primer and to evaluate the methodology. The established real-time PCR method and nested PCR method were used to detect and analyze 123 mouse books. Results the real-time method developed in this study was only positive for spirochetes of Lyme disease, and the minimal detection concentration was 101copies/ 渭 L. The average coefficient of variation (CV) was 1.56% and 2.30.123 mouse samples were detected by real-time PCR in 59 cases of positive nested-PCR. Conclusion the newly established real-time PCR method has the advantages of rapidity, sensitivity and specificity, and can be used for the detection of Lyme disease spirochetes in mouse.
【作者单位】： 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室;
【基金】：Supported by the 12th Five-Year Major National Science and Technology Projects of China(Nos.2012ZX10004219-007and2013ZX10004001)~~
【分类号】：R514;R440

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：2126217