Toll样受体基因多态性与HBV相关性肝炎、肝硬化、肝癌的遗传易感性研究

发布时间：2019-09-11 10:46

【摘要】：目的：Toll样受体(Toll-like receptors, TLRs)作为一类跨膜信号传递受体,在机体的天然免疫和获得性免疫应答中发挥重要作用,特别是在抗感染、抗肿瘤方面。TLRs与疾病的关联主要取决于其丰富的基因多态性。本研究通过检测Toll样受体3(TLR3)基因rs1879026、rs3775290和Toll样受体9(TLR9)基因rs187084、rs5743836、rs5743845共五个位点的基因多态性,探讨广西地区人群中TLR3和TLR9基因多态性与HBV相关性肝炎、肝硬化、肝癌遗传易感性的关系。方法：选取广西地区的健康体检者186例作为对照组,首次入院的HBV相关性肝脏疾病患者437例为病例组,其中包括慢性乙型肝炎患者(CHB组)172例,乙型肝炎肝硬化患者(LC组)91例,HBV相关性肝癌患者(HCC组)174例。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分别检测TLR3基因rs1879026、rs3775290和TLR9基因rs187084、rs5743836、rs5743845共五个位点的基因多态性,并利用DNA直接测序法进行测序验证,计算其基因型及等位基因频率。应用拟和优度x2检验对各SNP位点进行哈-温平衡检测,采用logistic回归分析校正性别、年龄等混杂因素后计算OR和95%CI,从而对各SNP多态性和HBV相关性肝炎、肝硬化、肝癌遗传易感性进行关联分析。应用SHEsis软件分别对TLR3基因两个SNP位点和TLR9基因三个SNP位点进行单倍型分析。结果： 1.对照组与CHB组、LC组、HCC组在性别和年龄组成上的差异无统计学意义(P值均大于0.05),说明各组研究对象均具有可比性。各病例组和对照组中TLR3基因rs1879026、rs3775290和TLR9基因rs187084、 rs5743836、rs5743845位点的基因型分布频率均符合哈-温平衡定律(P值均大于0.05),说明研究人群具有群体代表性。 2. TLR3rs1879026位点有CC、AC、AA三种基因型。各病例组与对照组相比,以CC基因型作为参照,AC、AA基因型在CHB、LC和HCC中分布频率的差异均无统计学意义(P值均大于0.05),以野生型C等位基因为参照,A等位基因在CHB、LC和HCC中分布频率的差异均无统计学意义(P值均大于0.05),提示rs1879026基因多态性可能与CHB、LC和HCC的患病风险无相关性。 3. TLR3rs3775290位点有GG、AG、AA三种基因型。各病例组与对照组相比,以GG基因型作为参照,经统计分析发现AG基因型和LC的患病风险有关(P=0.047),可能是肝硬化的一个保护因素；AA基因型和CHB、LC和HCC的患病风险均有相关性(P=0.048,P=0.010,P=0.027),可能是乙肝病毒相关性肝脏疾病的保护因素；将显性模型AG+AA与GG分析,我们可看到与对照组相比,AG+AA在LC组和HCC中的分布频率差异有统计学意义(P=0.009,P=0.026)。以野生型G等位基因为参照,统计结果显示A等位基因在CHB组、LC组和HCC组中分布频率的差异有统计学意义(P=0.004,P=0.001,P=0.001)。 4.TLR9rs187084位点有TT、TC、CC三种基因型。各病例组与健康对照组相比,以TT基因型作为参照,显示TC、CC基因型与CHB、LC、HCC的患病风险均无相关性(P值均大于0.05)。以野生型T等位基因为参照,发现C等位基因在LC组和对照组中分布频率的差异有统计学意义(P=0.045),而CHB组、HCC组与对照组相比差异无统计学意义(P值均大于0.05),提示C等位基因可能是肝硬化的一个保护因素。 5. TLR9rs5743836位点在所有研究对象中只发现有TT和TC两种基因型。TC基因型和C等位基因在CHB组、LC组和HCC组中分布频率的差异均无统计学意义(P值均大于0.05)；TLR9rs5743845位点只出现GG和AG两种基因型,AG基因型和A等位基因在CHB组、LC组和HCC组中分布频率的差异均无统计学意义(P值均大于0.05), rs5743836、rs5743845两个位点的多态性可能与广西地区人群HBV相关性肝炎、肝硬化、肝癌患者的患病风险无关。 6.我们在性别分层分析中发现TLR3rs3775290位点在肝癌组中的男女基因型分布存在性别差异,差异有统计学意义(P=0.001)。TLR3rs3775290位点的AA基因型和A等位基因与男性人群肝硬化和肝癌的患病风险有关(P值均小于0.05),可能是男性肝硬化和肝癌的保护因素,而与女性人群的HBV相关性肝脏疾病的患病风险无关。’TLR3rs1879026和TLR9rs187084位点的多态性无论是在男性人群还是在女性人群均与广西HBV相关性肝炎、肝硬化和肝癌无相关性(P值均大于0.05)。 7.TLR3基因rs1879026和rs3775290构成的CA单倍型携带者患HBV相关性肝炎、肝硬化和肝癌的风险降低(P=0.017,P=0.001,P=0.008),可能是HBV相关性肝脏疾病的保护因素。而CG单倍型患肝硬化的风险增加至1.82倍(P=0.002),提示CG单倍型可能是肝硬化的易感因素。 8.TLR9基因rs187084、rs5743836和rs5743845三个位点构建的CTG单倍型降低肝硬化的患病风险(P=0.047,OR=0.74),提示CTG单倍型有可能是肝硬化的一个保护因素。而TTG单倍型与HBV相关性肝脏疾病的患病风险无关(P值均大于0.05)。结论： 1.TLR3基因rs1879026位点多态性可能与广西地区人群HBV相关性肝炎、肝硬化、肝癌的患病风险无关。而rs3775290位点AA基因型和A等位基因均与HBV相关性肝炎、肝硬化和肝癌的患病风险有关,可能是HBV相关性肝脏疾病的保护因素；AG基因型与肝硬化患病风险有关,也可能是肝硬化的一个保护因素。 2.TLR9基因rs187084位点C等位基因与肝硬化遗传易感性相关,可能是肝硬化的一个保护因素。而rs5743836、rs5743845两个位点的多态性可能与广西地区人群HBV相关性肝炎、肝硬化、肝癌的患病风险无关。 3.性别分层分析中发现TLR3rs3775290位点在肝癌组中的男女基因型分布存在性别差异,且TLR3rs3775290位点的AA基因型和A等位基因与男性人群肝硬化和肝癌的患病风险有关,可能是男性肝硬化和肝癌的保护因素,而与女性人群的HBV相关性肝脏疾病的患病风险无关。 4.TLR3基因rs1879026和rs3775290构成的CA单倍型携带者患HBV相关性肝炎、肝硬化和肝癌的风险降低,可能是HBV相关性肝脏疾病的保护因素。而CG单倍型患肝硬化的风险增加,提示CG单倍型可能是肝硬化的易感因素。 5.TLR9基因rs187084、rs5743836、rs5743845三个位点构建的CTG单倍型降低肝硬化的患病风险,提示CTG单倍型可能是肝硬化的一个保护因素。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R512.62

【参考文献】