森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片多重检测方法的建立及应用

发布时间：2019-10-08 04:29

【摘要】：目的建立森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片检测方法。方法将病毒抗原包被微球,利用病毒抗体和阳性血清建立并优化森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片检测方法,评价方法的敏感性和准确性。结果建立的液相蛋白芯片检测方法病毒抗体和生物素标记二抗的孵育时间均为1 h,生物素标记羊抗兔Ig G和羊抗人Ig G最佳稀释度分别为1∶200和1∶100,能对3种病毒单一和混合感染准确检测。对295份临床样本的检测结果表明,该方法具有高通量、快速、敏感、特异的特点。结论本方法能对3种虫媒病毒同时进行快速检测,为虫媒病毒的筛查检测提供一种新方法。
【图文】：

森林脑炎病毒,诊断效率,乙型脑炎病毒,森林脑炎

现代预防医学2015年第42卷第6期ModernPreventiveMedicine，2015，Vol.42，NO.62.4人感染森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片多重检测方法的临床应用实验结果实验结果见表1，所建立的液相蛋白芯片检测方法与实时荧光RT-PCR法比较，对于检测登革热病毒，敏感性为69.05%，特异性为79.50%，，诊断效率为76.41%；对于检测乙型脑炎病毒，敏感性为72.73%，特异性为81.00%，诊断效率为80.57%；与血清学ELISA检测方法比较，对于检测登革热病毒，敏感性为70.87%，特异性为85.64%，诊断效率为80.28%；对于检测乙型脑炎病毒，敏感性为51.61%，特异性为90.60%，诊断效率为79.51%。血清学ELISA与实时荧光RT-PCR法比较，对于检测登革热病毒，敏感性为64.29%，特异性为75.50%，诊断效率为72.18%；对于检测乙型脑炎病呈下降趋势，当血清样品在进行1∶1至1∶50稀释时，能检测到较好的MFI。随着生物素标记羊抗人IgG稀释度增加，MFI呈下降趋势，当进行1∶100和1∶200稀释时，MFI差别不大，选取生物素标记羊抗人IgG进行1∶100稀释。本方法因森林脑炎病人血清样品缺乏，未进行检测。从已检测的2种病人血清样品的结果来看，实验无交叉反应。图2森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片多重检测方法的建立及应用实验结果·1067·

诊断效率,乙型脑炎病毒,森林脑炎,登革热病毒

现代预防医学2015年第42卷第6期ModernPreventiveMedicine，2015，Vol.42，NO.62.4人感染森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片多重检测方法的临床应用实验结果实验结果见表1，所建立的液相蛋白芯片检测方法与实时荧光RT-PCR法比较，对于检测登革热病毒，敏感性为69.05%，特异性为79.50%，诊断效率为76.41%；对于检测乙型脑炎病毒，敏感性为72.73%，特异性为81.00%，诊断效率为80.57%；与血清学ELISA检测方法比较，对于检测登革热病毒，敏感性为70.87%，特异性为85.64%，诊断效率为80.28%；对于检测乙型脑炎病毒，敏感性为51.61%，特异性为90.60%，诊断效率为79.51%。血清学ELISA与实时荧光RT-PCR法比较，对于检测登革热病毒，敏感性为64.29%，特异性为75.50%，诊断效率为72.18%；对于检测乙型脑炎病呈下降趋势，当血清样品在进行1∶1至1∶50稀释时，能检测到较好的MFI。随着生物素标记羊抗人IgG稀释度增加，MFI呈下降趋势，当进行1∶100和1∶200稀释时，MFI差别不大，选取生物素标记羊抗人IgG进行1∶100稀释。本方法因森林脑炎病人血清样品缺乏，未进行检测。从已检测的2种病人血清样品的结果来看，实验无交叉反应。图2森林脑炎、登革热和乙型脑炎病毒液相蛋白芯片多重检测方法的建立及应用实验结果·1067·
【作者单位】：四川国际旅行卫生保健中心;四川出入境检验检疫局;
【基金】：国家质检公益性科研项目(航空口岸输入性传染病联防联控技术体系研究,201210046) 国家质检总局科研项目(人感染虫媒传染病病毒液相蛋白芯片检测技术研究2012IK239) 四川出入境检验检疫局科研项目(登革、基孔肯雅、乙脑高通量快速检测方法的建立及应用SK201301)
【分类号】：R512.3;R512.8

【参考文献】