HBV感染对铁调素表达的影响及铁调素抗HBV活性的初步研究

发布时间：2020-06-12 13:31

【摘要】：目的探究HBV感染对铁调素表达的影响及铁调素抗HBV活性的初步研究。方法收集71例慢性乙型病毒性肝炎(Chronic Hepatitis B,CHB)患者(CHB组)、24例健康体检者(对照组)血清标本,采用ELISA法检测血清铁调素(Hepc)水平,使用全自动蛋白分析仪检测血清铁(SI)、铁蛋白(SF)和转铁蛋白(TRf)水平。使用电化学发光全自动免疫分析仪检测血清IL-6水平。根据患者近期肝穿病理炎症活动度分级(G)结果将CHB组分为炎症轻度组(G_1-G_2)、中度组(G_3)、重度组(G_4)比较Hepc、SI、SF、TRf水平。测定CHB组HBV-DNA、HBsAg、HBeAg水平,分析铁调素水平与病毒学指标、肝功生化指标间的相关性。构建HBV感染Huh7细胞模型,分别采用RT-qPCR,Western blot技术检测肝细胞铁调素的表达情况。使用铁调素处理pcDNA1.3转染的HepG2细胞及pSM2转染的Huh7细胞,检测并分析不同时间点铁调素处理组与未处理组之间培养上清液中HBV-DNA、HBeAg水平的差异。结果与对照组相比CHB组SI、SF、IL-6、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清总胆红素(TBIL)均显著升高,Hepcidin、TRf和可溶性转铁蛋白受体(sTfR)、白蛋白(ALB)显著降低(P0.05)。CHB患者血清铁调素水平与HBV-DNA(r=-0.467,P0.05)、HBsAg(log_(10))(r=-0.567,P0.05)、HBeAg(r=-0.434,P0.05)呈显著负相关,与血清ALB、TBIL水平呈显著正相关(P0.05),与ALT、AST水平未见明显相关性(P0.05)。转染细胞24 h,Hepc mRNA相对水平为(5.21±0.43),空白对照细胞的(0.73±0.14)显著升高(P0.05),在转染48 h,细胞Hepc mRNA水平为(8.45±0.61),较空白对照的(1.16±0.17)显著升高(P0.05);在质粒转染48 h后,细胞Hepc蛋白相对表达量为(0.78±0.08),较空白对照的(0.41±0.02)显著升高(P0.05)。与未处理组比较,pcDNA1.3转染HepG2细胞铁调素处理组在12h时即出现HBV DNA水平下降,在48h时HBV DNA水平显著降低(P0.05),pSM2转染Huh7细胞铁调素处理组在24h即出现HBV DNA水平下降,在48h时HBV DNA水平显著降低(P0.05)。与未处理组比较,pcDNA1.3转染HepG2细胞铁调素处理组在24h时即出现HBeAg表达下降,在48h时HBeAg表达显著降低(P0.05),pSM2转染Huh7细胞铁调素处理组在24h时即出现HBeAg表达下降,在48h时HBeAg表达显著降低(P0.05)。结论检测铁调素及其铁代谢相关指标有助于评估慢性乙型肝炎病情进展,适当予以铁调素或者其相应内源性激活剂针对性地治疗铁超载CHB患者,是否可应用于临床,值得期待。并初步证明了铁调素具有一定的抑制HBV复制的活性。
【图文】：

安徽医科大学硕士毕业论文P<0.05）、TBIL(图 1E)水平呈显著正相关性（r=0.467，P<0.05）。可见 HBV 感染者血清铁调素水平随血清 ALB、TBIL 水平的升高而升高。3.3.4 乙型肝炎病毒感染者血清铁调素水平与血清 ALT、AST 的相关性分析相关性分析结果显示：HBV 感染者血清铁调素与 ALT(图 1F)（r=0.096，P=0.428）、AST(图 1G)（r=0.044，P=0.716）水平未见明显相关性（P>0.05）。

安徽医科大学硕士毕业论文后，24h Hepcidin mRNA 相对表达量实验组(5.21±0.43)较对照组(0.73±0高，，48h 实验组(8.45±0.61)较对照组(1.16±0.17)显著升高，差异有统计学<0.05）(图 2)。转染 pCDNA1.3 质粒与等量空载质粒（pBlue-ks）48h 后实cidin 蛋 白相 对 表 达量 实 验 组 (0.78±0.08) 较 对照 组 (0.41±0.02) 显 著<0.05），差异有统计学意义(P<0.05)(图 3)。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R512.62

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本文编号：2709603