甘草甜素对大鼠HAART药物心肌损伤的保护效应与机制

发布时间：2017-03-28 17:18

本文关键词：甘草甜素对大鼠HAART药物心肌损伤的保护效应与机制，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：第一部分大鼠HAART药物心肌损伤及甘草甜素干预实验模型制备目的:大鼠HAART药物心肌损伤及甘草甜素(GL)干预实验模型制备及其评价。方法:清洁级成年雄性SD大鼠(200±10g)30只,随机分5组(n=6):正常组(CON)、HAART qd、HAART bid、GLqd、GL bid。CON组大鼠生理盐水(NS,10ml/kg)灌胃,每天8am、6pm各1次;HAART qd组大鼠8am灌等容积HAART药物(含AZT 62.5 mg/kg+3TC 31.25 mg/kg+LPV/r(83.33/20.83)mg/kg),6pm灌等容积NS;HAART bid组大鼠8am、6pm均灌等容积HAART药物(含AZT 31.25mg/kg+3TC 15.63 mg/kg+LPV/r(41.67/10.42)mg/kg);GL qd组大鼠8am灌等容积HAART药物(同HAART qd组),另含GL 200mg/kg,6pm灌等容积NS;GL bid组大鼠8am、6pm均灌等容积HAART药物(同HAART bid组),另含GL 100mg/kg。每次灌胃前测体重,连续4周,制备成年大鼠在体心肌HAART药物损伤及GL干预模型。各组大鼠末次灌胃后禁食12h,描记心电图,左心室插管检测大鼠左心室血流动力学指标(HR、LVSP、LVEDP、LVP±dp/dtmax),评价大鼠生长情况和心脏功能。结果:与CON组比较,HAART组大鼠体重增长少,其中HAART qd组大鼠体重增长比HAART bid组少;与HAART qd组相比,GL qd组大鼠体重增长无明显差异;与HAART bid组相比,GL bid组大鼠体重增长多。与CON组比较,HAART组大鼠LVSP、LVP+dp/dtmax降低,LVEDP升高、LVP-dp/dtmax降低,提示心脏收缩、舒张功能下降;与HAART qd组相比,GL qd组大鼠心脏功能无差别;与HAART bid组相比,GL bid组大鼠心脏舒张功能改善。结论:大鼠HAART药物灌胃28天造成大鼠损伤,表现为体重增长缓慢,心脏收缩、舒张功能下降;其中HAART药物每天分2次给药(HAART bid)比1次给药(HAARTqd)损伤轻。甘草甜素(200mg/kg)每天1次未能减轻大鼠HAART qd造成的损伤,而甘草甜素(100mg/kg)每天2次可减轻大鼠HAART bid造成的损伤。第二部分甘草甜素对大鼠HAART药物心肌损伤的保护效应及机制目的:观察不同剂量甘草甜素(GL)对大鼠HAART药物心肌损伤的保护效应并探讨其机制。方法:清洁级8周龄雄性SD大鼠60只,随机分5组(n=12):对照组(CON)、模型组(HAART)和低、中、高剂量甘草甜素保护组(GL 50、GL100、GL200)。CON组大鼠生理盐水(NS,10ml/kg)灌胃,每天8am、6pm各1次;HAART组每次灌等容积HAART药物(含AZT 31.25 mg/kg+3TC 15.63 mg/kg+LPV/r(41.67/10.42)mg/kg);GL 50、GL100、GL200组每次灌胃除含HAART药物外,分别另含GL(25、50、100mg/kg)。每次灌胃前测体重,连续4周。各组大鼠末次灌胃后,禁食12h,描记心电图,左心室插管检测大鼠左心室血流动力学指标(HR、LVSP、LVEDP、LVP±dp/dtmax);颈总动脉插管处取血,测血红蛋白、血清血脂四项(TG、CHOL、LDL-C、HDL-C)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)和心肌肌钙蛋白I(c Tn I);取红细胞、心肌组织及心肌组织线粒体检测Na+-K+-ATP酶;取血浆和心肌组织及心肌组织线粒体匀浆测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、还原型谷胱甘肽(GSH);HE染色观察心肌组织学结构;Masson染色观察心肌组织纤维化情况;透射电镜观察心肌细胞超微结构;免疫印迹法检测心肌组织Bcl-2、Bax和c Tn I蛋白表达。结果:与CON组比较,HAART组大鼠体重增长少;心电图显示ST段压低,心率呈降低趋势,LVSP、LVP±dp/dtmax降低,LVEDP升高;TG、CHOL升高,HDL-C降低;血清心肌酶AST、CK、CK-MB及c Tn I升高;红细胞、心肌组织及心肌线粒体Na+-K+-ATP酶活性降低;血浆脂质过氧化产物MDA增加,抗氧化物SOD、GSH-PX和GSH降低;心肌组织和线粒体MDA升高,SOD、GSH-PX和GSH降低;HE染色显示心肌组织学结构损伤,Masson染色显示心肌组织纤维化;透射电镜观察心肌细胞超微结构显示心肌细胞肌原纤维、线粒体结构异常;免疫印迹技术检测显示心肌组织Bcl-2表达减少、Bax蛋白表达增加,c Tn I蛋白表达减少。与HAART组比较,GL干预组大鼠体重增长多;心电图ST段回升,LVSP、LVP±dp/dtmax高,LVEDP低;TG、CHOL和LDL-C低,HDL-C高;红细胞Na+-K+-ATP酶活性高;血清AST、CK、CK-MB、LDH和c Tn I低;血浆MDA低,SOD、GSH-PX和GSH高;心肌组织及线粒体MDA低,SOD、GSH-PX和GSH高,Na+-K+-ATP酶活性高;HE染色显示心肌组织学结构损伤减轻,Masson染色显示心肌组织纤维化减少;透射电镜观察心肌细胞超微结构显示心肌细胞肌原纤维、线粒体结构接近正常;免疫印迹法检测显示心肌组织Bcl-2和c Tn I蛋白表达高、Bax蛋白表达低。其中GL100组各指标改善效果好。结论:HAART药物灌胃4周造成大鼠损伤,心肌功能、代谢、结构异常。适宜剂量GL可保护HAART大鼠减轻损伤,其机制与GL改善大鼠脂质代谢、增强抗氧化能力、减少自由基的产生,保护红细胞能量代谢,维持心肌组织及线粒体能量代谢及抗氧化代谢,减少心肌细胞凋亡,保护心肌组织细胞结构有关。
【关键词】：HAART 齐多夫定 拉米夫定 克力芝 心肌保护 甘草甜素
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R512.91;R542.2
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