安徽省阜阳市秋冬型恙虫病病原体基因型及流行危险因素研究

发布时间：2020-10-23 16:09

　　 目的恙虫病是一种由感染恙虫病东方体的恙螨叮咬人类而引起的人畜共患传染病。目前,恙虫病在我国流行呈现出北移的趋势,在此过程中恙虫病的流行特征、传播媒介、储存宿主及基因型别与南方省份相比均发生了变化。安徽省阜阳市自2008年9-12月首次暴发一起恙虫病疫情后,之后在阜阳市每年9-12月均有不明原因发热、临床诊断为恙虫病的暴发疫情,发病人数逐年增加,严重危害人类健康。目前恙虫病的基因型别未知,流行病学特征模糊不清,发病危险因素尚未确定。本文针对这些问题进行一系列的研究。方法我们对临床病人血液标本进行恙虫病病原体分离培养、核酸检测以及病人双份血清恙虫病抗体检测3种方法进行暴发疫情的病原学研究,并进一步确定其基因型别;对捕获的582只啮齿类动物以及1784只恙螨进行恙虫病宿主和传播媒介的研究;对收集的4547份2008-2015年间阜阳市临床诊断恙虫病病例资料、进行流行病学分析;同时结合农业资料,188份病人调查问卷进行统计学分析,确定恙虫病发生发展的危险因素。结果成功分离出恙虫病病原体,其基因型以Kawasaki型为主。病原研究发现阜阳市不明原因发热病人急性期血液恙虫病核酸阳性率为36.43%(204/560),且双份血清恙虫病IgG抗体66.67%(112/168)出现四倍下降甚至消失。流行病学研究发现恙虫病在阜阳市各县区均有分布,具有地区差异性(x~2=659,P0.05),颍上县的发病率最高;发病时间具有季节性和周期性,发病时间为9-12月,发病周期为一年;农民是感染恙虫病的高危人群(x~2=52.568,P0.05);女性的发病率高于男性(x~2=46.588,P0.05);人群对恙虫病普遍易感,高发年龄段为60-69岁。危险因素分析表明,2008-2015年间,春秋两季共布置鼠夹或鼠笼6690个,捕获野鼠582只,t检验确定阜阳市秋季鼠密度大于春季。黑线姬鼠占捕获的啮齿类动物72.85%(424/582),在鼠耳中共收集到1784只恙螨,其中小盾纤恙螨占87.05%(1553/1784);黑线姬鼠的鼠密度4-6月分别为1.03%、1.50%、2.16%,9-12月的鼠密度分别为7.89%、14.43%、9.57%、3.04%;黑线姬鼠的东方体感染率为41.98%,4-6月为0、0、9.52%,9-12月为19.12%、52.84%、55.36%、30.77%;黑线姬鼠对小盾纤恙螨的带螨率和带螨指数在4-6月,9-12月分别为25%和0.125、23.08%和0.154、23.81%和0.667、54.41%和2.029、73.30%和4.199、60.71%和5.688、26.92%和0.815;小盾纤恙螨的东方体感染率9-12月分别为16.22%、45.47%、44.12%和28.57%,其余月份小盾纤恙螨不携带病原体。黑线姬鼠的鼠密度,鼠东方体感染率、带螨率、带螨指数和螨东方体感染率的时间变化趋势和恙虫病的发病时间趋势相同,具有正相关性。对188例恙虫病患者的问卷调查确定恙虫病的潜伏期为7.11±3.24天;188份调查问卷统计分析显示,病例最早出现在9月中旬,9月份病例数少,10月份上升,在11月上旬达高峰后下降,12月份偶见少数病例。对居住环境的统计发现,188例患者中有157例患者居住在田边或沟塘边,家中常有鼠洞和老鼠出没;相关性分析明确了秋季农作物的耕种面积与恙虫病的发生呈正相关关系(r=0.856,P0.05)。在阜阳市,秋季的主要农作物为玉米、大豆、红薯和少量的水稻;红薯地和大豆地均通过人工收割,玉米地是半机械收割,水稻通过机械化收割,多重线性回归显示病人感染恙虫病的主要途径是人工收割方式。188例患者发病前有185人有田间工作史,主要在玉米田,大豆田和红薯田进行劳动,共有183人(97.34%),人工收割大豆和红薯发病人数有141人(76.22%)。结论阜阳市秋冬季暴发的不明原因发热疫情,经实验室确诊为恙虫病疫情,阜阳市恙虫病基因型以Kawasaki型为主。本研究详细描述了阜阳市恙虫病秋冬季节发病的流行病学特征,证明恙虫病在阜阳市地域分布广泛,具有地区差异性;秋冬季暴发,10-11月为发病高峰,具有明显季节性;农民是高危人群,60-69岁为高发年龄段,女性的发病率高于男性。结合恙虫病发病潜伏期调查,首次分析出恙虫病流行的危险因素,认为每年9月份的啮齿类动物调查具有重要意义,提出秋季黑线姬鼠鼠密度≥7.89%、黑线姬鼠的感染率≥19.12%、带螨率≥54.41%、带螨指数≥2.029、小盾纤恙螨的东方体感染率≥16.22%,为恙虫病发生暴发流行的预警指标;本课题研究显示,居住环境和工作环境增加了人群暴露机率。居住和生活在田边和沟塘处,以及人工收割方式都增加了暴露机率,使恙虫病的感染率增加。病原学研究对临床诊断和治疗具有指导意义,有助于降低恙虫病的误诊率和漏诊率;流行病学调查和危险因素分析的科学数据为我国长江以北平原地区秋冬型恙虫病的防控提供了科学依据和理论基础。
【学位单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R513.2
【部分图文】：

（图 1：Dif-quick 染色和 Giemsa 染色法对正常和感染后 L929 细胞染色的显微照片。细胞质中被观察到胞内细菌可能是恙虫病东方体，箭头指示为病原体出现区域。）(Fig.1. Photomicrographs of Dif-quick-stained and Giemsa-strained infected and normal L929cells. Intracellular bacteria observed in the cytoplasm were supposed to be O. tsutsugamushi andwere indicated by an arrow.)

16（图 2：恙虫病 56-kDa 蛋白基因序列树，本研究中所得到的基因序列号MK238454-MK238481。）(Fig.2. Phylogenetic tree of 56-kDa protein gene sequence of O. tsutsugamushi. The gesequence number obtained in this study was from MK238454 to MK238481.)

恙虫病的发病人数总体呈逐年上升趋势。直到 2015 年，报告病例数比2008 年增加 6.12 倍。(图.4. 安徽省阜阳市 2008-2015 年间 4547 例恙虫病发病时间分布图，病例发生集中在 9-12月份，10 月份是发病高峰期，为典型的秋冬季型恙虫病。)(Fig.4. Monthly distribution of reported cases of scrub typhus in Fuyang city, from 2008 to2015. The cases occurred from September to December, and October was the peak, which was the“Autumn- winter type scrub typhus”. )在发病人群中，有 4004 例是农民，占病例总数 88.06%。农民的发病率高于非农民（x2= 52.568，P<0.05）。在研究期间，农民所占的比例从 2008 年的 77.45％增加到 2014 年的 91.69％
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本文编号：2853248