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唾液中水痘-带状疱疹病毒检测的临床应用研究

发布时间:2020-12-16 12:58
  背景带状疱疹由水痘-带状疱疹病毒(varicella-zostervirus,VZV)感染引起。其典型的临床表现为发于单侧的红斑基础上出现簇集性水疱,并伴有神经痛,医师常据此对其作出诊断。但临床上尚有一些不伴皮损发生的特殊类型带状疱疹,如顿挫型带状疱疹、眼带状疱疹、带状疱疹脑膜炎等,此时诊断常需依靠实验室检查,如检测患者脑脊液或血单核淋巴细胞中VZVDNA、抗体等。而VZVDNA亦存在于带状疱疹患者的唾液中,唾液中VZV DNA的检测可能有助于诊断VZV引起的相关疾病,对唾液进行检测,可以避免侵入性的检查,如腰椎穿刺等。目的探讨唾液在带状疱疹诊断中的意义,分析唾液中VZV DNA载量的影响因素及其与带状疱疹患者临床症状、细胞因子IL-2、IL-6、IL-18水平以及是否发展为带状疱疹后遗神经痛(Postherpetic neuralgia,PHN)之间的关系,分析唾液在带状疱疹发病过程中评估患者病情及预后的临床应用价值,为带状疱疹患者的临床管理提供新的思路。方法1,纳入2018年1月至2019年8月就诊于我院的带状疱疹患者63例,记录患者情况并根据病情评分表分为轻中度组和重度组,在其治... 

【文章来源】:南方医科大学广东省

【文章页数】:68 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

唾液中水痘-带状疱疹病毒检测的临床应用研究


图1-1带状疱疹患者??Figure?1-1?patients?withherpes?zoster??

标准曲线,反应体,反应条件,标准曲线


?领士学位论文???标准曲线?V?=?-3.496x+41.93??R2?=?0.9997??30?_???????'?::?■??I?s?15???????C?*??I?10????????5????0?2?4?6?8?10??IgVZVDNA拷贝值??图1-2标准曲线??Figure?1-2?standard?curve??(2)?PCR反应体系及反应条件??反应体系共20?|iL,包括5?pL?DNA、各0.5?pL上、下游引物、10?pL?2X??SYBRGreenqPCRSuperMix、4nLdh20。反应条件:95°C2?分钟,95°C10?秒、??60°C32秒,扩增40个循环,在60°C下采集荧光。??(3)具体操作步骤如下:??①从-20°C冰箱中取出己提取好的DNA,置于室温下融化,短时离心后置于??试管架上;??②在PCR管中依次加入0.5吣上游引物、0.5?pL下游引物、10?pL2X?SYBR??GreenqPCRSuperMix、4|iLdh2〇。将以上配置好的反应体系在震荡机短时震荡??使其充分混合均匀;??③向装有己配置好反应体系试剂的PCR管中按顺序依次加入DNA、阳性质??控品、阴性质控品,各5仏。至于离心机中,3000rpm,常温下离心1分钟,使??其混合均匀、液体不沾管壁。在PCR管一侧突出处做好标记,切勿在管壁上标??记以免影响荧光的收集;??④将己标记好的PCR管按顺序置于PCR扩增仪中,按照上述反应条件于仪??11??

扩增曲线,唾液,样本,统计学


?第一章唾液在带状疱疹诊断中的应用价值观察???异具有统计学意义(t?=?9.43,P<0.01)。VZVDNA阳性的血清样本中,患者组??病毒载量(2.25?±1.70)亦高于对照组(1.10?±0.25),差异有统计学意义(t?=?4.71,??P<?0.01)(如图?1-5?所示)。??Delta?Rn?vs?Cvcte??,KC?■?*?二??…?:-"??s?^?'?ft?I'pM??j。?n:?i/f?ijfif??:??*■*??— ̄^一:.?二……??4"'.?;?-;?i?:?!??*1??i.r??-W.IOM?,ynr*m.C^i?.??图1-3?VZV?DNA扩增曲线??Figure?1-3?Real-time?PCR?amplification?curve?of?VZV?DNA??1?2?3?4?5?6?7?8??i?p??:>〇〇〇??l?ooo??7!>()??500??2r>o??i?〇〇??图1-4部分样品PCR产物电泳图??Fig?l-4Part?of?samples’electrophoretogram?of?PCR?products??注:1为阳性对照;2为阴性对照;3?5为不同病人的唾液样本;6?8为血清样本??1?is?positive?control;?2?is?negative?control;?3-5?are?saliva?of?different?patients?respectively;?6-8?are??serum?samples?.??14??

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本文编号:2920196

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