结核分枝杆菌感染相关低密度中性粒细胞的形成机制研究

发布时间：2020-12-23 11:07

　　研究目的:探讨结核分枝杆菌感染过程中,外周血正常密度中性粒细胞（NDGs）向低密度中性粒细胞（LDGs）转化的相关机制。研究方法:采集结核病患者的外周血,密度梯度离心后在外周血单个核细胞（PBMC）层通过免疫磁珠分选法得到LDGs,在粒细胞层通过裂解红细胞得到NDGs。分别在不经过预处理和在PMA刺激的条件下对两种细胞进行免疫荧光染色,分析并比较其中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）的释放水平。LDGs生成与NETs释放关系探讨:（1）用PMA刺激诱导中性粒细胞释放NETs,通过免疫荧光技术检测中性粒细胞释放NETs的情况,同时用流式细胞术检测LDGs的生成情况。（2）在结核分枝杆菌（Mtb）感染中性粒细胞的基础上,分别采用Zn²⁺螯合剂TPEN下调NETs的生成和采用PMA刺激上调NETs的生成,探讨调控NETs的释放对LDGs生成的影响。中性粒细胞活性氧（ROS）的产生与LDGs形成关系探讨:（1）通过检测Mtb感染后中性粒细胞ROS产生情况探讨ROS产生与LDGs形成间的可能关系（2）在Mtb感染的基础上,分别用N-乙酰半胱氨酸（NAC）和二联苯碘（DPI）预处... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

流式细胞技术检测LDGs与NDGs的纯度

图 2.2 免疫荧光技术检测各组 NETs 的生成情况A , 各组细胞 NETs 生成的免疫荧光图B , 各组细胞 NETs 生成的定量结果注： ** P<0.001 ***P<0.0001中性粒细胞形成 LDG 的同时伴随 NETs 释放 Mtb 感染健康人来源的纯化正常密度中性粒细胞s 的水平及 NETs 生成情况。结果显示：Mtb 感s[（1.07±0.91）% vs（22.48±6.70）%, P<0.0001 转化为 LDGs 的过程中伴随大量 NETs 的释放, 如tb 感染后 RFU 水平从对照组的（0.000515 ± 0.0 0403），如图 2.4-B。

图 2.2 免疫荧光技术检测各组 NETs 的生成情况A , 各组细胞 NETs 生成的免疫荧光图B , 各组细胞 NETs 生成的定量结果注： ** P<0.001 ***P<0.0001中性粒细胞形成 LDG 的同时伴随 NETs 释 Mtb 感染健康人来源的纯化正常密度中性粒细Gs 的水平及 NETs 生成情况。结果显示：Mtb 感Gs[（1.07±0.91）% vs（22.48±6.70）%, P<0.00s 转化为 LDGs 的过程中伴随大量 NETs 的释放, Mtb 感染后 RFU 水平从对照组的（0.000515 ± 00 0403），如图 2.4-B。


本文编号：2933611