结核分枝杆菌DosR抗原Rv2029c诱导免疫应答及相关机制研究

发布时间：2021-01-01 23:05

　　由结核分枝杆菌感染引起的结核病仍然是世界范围内高发的感染性疾病之一,增加了全球公共卫生负担。卡介苗（Bacillus Calmette-Guérin,BCG）预防效果有限,研发新型结核疫苗为预防控制结核病的关键。研究发现,在结核分枝杆菌休眠期,由休眠生存调节子（dormancy survival regulon,DosR）编码的调控蛋白Rv2029c具有成为新型结核疫苗相关抗原的的潜能,而其引起的免疫应答及相关应答机制尚未完全阐明。目的:探索DosR抗原Rv2029c在先天性和适应性免疫应答中的作用及其相关机制。方法:（1）利用基因工程技术获取重组蛋白Rv2029c（rRv2029c）,用rRv2029c刺激C57BL/6小鼠腹腔巨噬细胞和THP-1细胞。通过Western Blot技术检测小鼠巨噬细胞Toll样受体2（toll-like receptor 2,TLR2）的表达和核转录因子κB（nuclear factor-κB,NF-κB）的磷酸化,利用流式细胞术检测巨噬细胞表面共刺激分子CD80、CD86和CD40的表达,初步探究Rv2029c在巨噬细胞活化中的作用。（2）用rRv... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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rRv2029c表达纯化与鉴定

（注：**表示 P<0.01）图 2-2 rRv2029c 诱导小鼠腹腔巨噬细胞聚集ng/mL、500ng/mL 和 1000ng/mL 三个不同剂量 rRv2029c 分别作用 24 h 后，收取细胞并提取蛋白，Western Blot 法检测巨噬细胞 TLp-p65）的表达情况。如图 2-3A 所示，rRv2029c 作用下，小鼠巨噬F-κB（p-p65）表达量发生改变。对蛋白条带进行分析，如图 2-3照组相比，不同剂量 rRv2029c 作用后，小鼠巨噬细胞 TLR2 表达，差异具有统计学意义（P<0.01）；如图 2-3C 所示，与对照组相比0ng/mL）rRv2029c 作用下，小鼠巨噬细胞 NF-κB（p-p65）表达量增统计学意义（P<0.05）。结果表明，rRv2029c 可上调小鼠巨噬细胞同时低剂量（100 ng/mL）rRv2029c 引起了下游 NF-κB 磷酸化。

州大学硕士学位论文 结核分枝杆菌DosR抗原Rv2029c诱导免疫应答及其相关机制分析，如图 2-4 B 所示，与对照组相比，CD40 分子表达增加，差异具有统意义（P<0.01）；CD80 分子表达增加，差异具有统计学意义（P<0.05）。结明，rRv2029c 可诱导小鼠腹腔巨噬细胞表面共刺激分子 CD40、CD80 和 CD表达。

【参考文献】：
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硕士论文
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本文编号：2952157