HMBPP/多肽E7对结核患者胸水及脐带血中γδT细胞分泌IL-6的影响

发布时间：2021-01-02 06:14

　　目的研究4-羟基-3-甲基-2-烯基焦磷酸（HMBPP）和多肽E7对结核患者胸水及脐带血中γδT细胞分泌白介素6（IL-6）的影响和机制。方法收集自广州市胸科医院临床诊断结核性胸膜炎患者胸水标本18例,自中山大学附属第三医院正常健康产妇脐带血标本17例。使用流式分选技术分选出结核性胸水和脐带血中的γδT细胞与CD277+CD14+单核-巨噬细胞混合培养,分别用HMBPP或E7刺激后,运用流式细胞术检测分泌IL-6的γδT细胞百分率及表达程序性死亡配体1（PD-L1）的CD277+CD14+单核-巨噬细胞百分率;利用RT-PCR技术检测细胞中IL-6、PD-L1的mRNA表达水平;用ELISA方法检测细胞培养上清中IL-6的含量;用PD-L1特异性小分子干扰RNA（siRNA）沉默PD-L1的表达以检测PD-L1是否参与分泌IL-6;在分选于结核性胸水和脐带血的共培养细胞中,HMBPP或E7刺激后上述指标在每一时间点对照组和实验组间分别采用独立样本t检验比较其差异,分析其统计学意义。结果在结核性胸水和脐带血中,给予HMBPP或E7刺激24 h之后,与对照组相比IL-6+γδ+T细胞占比显... 

【文章来源】：中华临床医师杂志(电子版). 2020年08期

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
资料与方法
    一、标本与材料
        1. 标本：
        2. 主要试剂和仪器：
    二、研究方法
        1. 单个核细胞分离、流式分选：
        2. 细胞培养：
        3. 流式染色：
        4. RNA提取、逆转录和实时荧光定量PCR:
        5. ELISA法检测细胞因子：
        6. 基因沉默技术：
    三、统计学分析
结果
    一、HMBPP和E7刺激上调γδT细胞胞内IL-6的表达量
    二、HMBPP和E7刺激上调γδT细胞胞内IL-6在mRNA水平的表达量
    三、HMBPP和E7刺激上调γδT细胞胞外IL-6的分泌量
    四、HMBPP和E7刺激上调CD277+CD14+单核-巨噬细胞中PD-L1在mRNA水平的表达量
    五、沉默PD-L1表达可降低IL-6在mRNA水平的表达量
讨论



本文编号：2952816