Nrf2抑制剂对细粒棘球蚴原头节的作用
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【摘要】:目的:研究Nrf2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2)抑制剂DRB(5,6-Dichlorobenzimidazole1-β-D-ribofuranoside)在体外对细粒棘球蚴原头节的影响。方法:从自然感染细粒棘球蚴病的羊肝中获取新鲜细粒棘球蚴原头节,并于RPMI 1640培养基体外培养。实验分为空白对照组、25g/l、50g/l、75g/l DRB处理组。通过伊红染色,在倒置显微镜下观察原头节活力和形态变化情况,绘制生长活力曲线。并在扫描电子显微镜下观察原头节超微结构变化。用Western blot方法检测细粒棘球蚴原头节内Nrf2蛋白表达。通过ELISA技术检测DRB作用原头节后NQO-1和HO-1的变化。结果:Nrf2抑制剂DRB对细粒棘球蚴原头节存在抑制作用,25g/l DRB组对原头节的杀伤作用不十分明显,相较空白对照差异不大。50g/l DRB处理组,在体外作用第一天后,原头节活力即受到抑制,随着抑制剂DRB作用时间的延长,至体外作用第4天时,检测到原头节活力下降一半。75g/l DRB处理组对原头节的杀伤作用更加显著,在体外作用至第6天时,检测到原头节全部死亡。药物作用效果呈浓度和时间依赖性。抑制剂DRB作用后,原头节超微结构发生改变。实验组原头节内Nrf2蛋白受抑制剂影响表达下降,NQO-1和HO-1在原头节内表达下降。结论:Nrf2信号通路抑制剂DRB在体外对细粒棘球蚴有显著抑制作用,可能为治疗细粒棘球蚴病提供一个新的思路。
【关键词】:细粒棘球蚴 原头节 Nrf2信号通路 体外实验
【学位授予单位】:石河子大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R532.32
【目录】:
- 中文摘要4-5
- 英文摘要5-6
- 英文缩略语表6-8
- 前言8-10
- 材料10-14
- 1 细粒棘球蚴原头节体外收集10
- 2 实验主要仪器设备10-11
- 3 实验主要试剂11-12
- 4 实验主要溶液配制12-14
- 方法14-18
- 1 细粒棘球蚴原头节的分离及体外培养14
- 2 Nrf2抑制剂DRB体外作用细粒棘球蚴原头节14
- 3 显微镜观察原头节活力和形态的变化14
- 4 扫描电子显微镜观察原头节表面结构变化14-15
- 5 Western blot检测原头节Nrf2蛋白表达15-16
- 6 ELISA法检测原头节NQO-1 和HO-1 表达16-17
- 7 统计学方法17-18
- 结果18-24
- 1 显微镜观察原头节活力和形态的变化18-19
- 2 原头节生长活力变化19
- 3 原头节超微结构变化19-21
- 4 原头节Nrf2表达情况21-22
- 5 原头节NQO-1 和HO-1 表达情况22-24
- 讨论24-26
- 结论26-27
- 参考文献27-30
- 综述30-41
- 参考文献37-41
- 致谢41-42
- 作者简介42-43
- 导师评阅表43
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