发热伴血小板减少综合征疫源地中斑点热群立克次体的调查研究

发布时间：2021-01-27 00:20

　　一、研究背景近年来,新发蜱媒传染病不断出现,给人类健康造成严重危害。由于传播媒介蜱的广泛存在,当人们进入自然疫源地时容易被蜱叮咬而感染发病。蜱携带的病原体种类丰富,包括斑点热群立克次体（Spotted Fever Group Rickettsiae,SFGR）、病毒、细菌、原虫等几大类。一只蜱可同时携带两种或两种以上病原体,被携带多种病原体的一只蜱或多只蜱叮咬后可引起复合感染。蜱传播的新型布尼亚病毒可引起发热伴血小板减少综合征（Severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS）,自2009年发现首例SFTS患者至今,我国已有25个省份报道了该疾病感染病例,其中,位于中东部地区的河南省和山东省为高发省份。SFTS通常表现为发热、血小板减少、白细胞减少和胃肠道症状,临床症状具有非特异性,需要与人粒细胞无形体病、肾综合征出血热等进行鉴别诊断。SFTS发病高峰期在每年的5月至7月,呈现明显的季节性,这主要与传播媒介蜱的生活习性相关。而且,长角血蜱已经被证实为SFTSV的传播媒介,其主要分布在我国中东部地区,以丘陵和山区最为丰富,SFTS患者大多是... 

【文章来源】：军事科学院北京市

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

哨点医院位置

军事科学院硕士学位论文第 7 页1.2 方法1.2.1 技术路线图 1. 2 技术路线图1.2.2 从标本中提取核酸1.2.2.1 从全血标本中提取 DNA使用 QIAamp DNA Blood Mini Kit 试剂盒（Cat.No.51106）从病人全血标本中提取DNA。具体实验步骤如下:（无菌操作均在生物安全柜中进行）实验前准备：首次使用时，Protease K 粉末加入5.5ml protease solvent，4℃保存备用；Buffer AW1 和 Buffer AW2 按照瓶壁说明加入对应剂量的无水乙醇，常温保存；打开恒温水浴箱锅预热到56℃。（1） 吸取200μl Protease K于无菌的1.5ml EP管管内底部；（2） 加入200μl病人EDTA抗凝血；（3） 加入200μl Buffer AL，涡旋振荡15s混匀；（4） 置于56℃水浴箱中10min，过程中多次取出摇匀；（5） 水浴结束后，将EP管瞬时离心；（6） 加入200μl无水乙醇（96%-100%），涡旋振荡15s混匀

例中 R. raoultii 的感染情况病例纳入结果 年至 2016 年，在两家哨点医院共纳入 1016 例病例，分别在山科大学附属医院纳入 124 例病例（A 医院）、在河南省信阳市 154 医院纳入 892 例病例（B 医院）。标本中 R. raoultii 基因片段扩增及序列分析结果经巢式PCR扩增SFGR基因片段为阳性且经序列分析，共有1ultii，阳性率为 1.5%。其中 A 医院有 2 例扩增阳性、B 医院有性率分别为：1.6%、1.5%。ompA 基因片段扩增及序列分析院的 2 例样本和 B 医院的 13 例样本经巢式 PCR 扩增 ompA阳性所获得的序列（KY474580），经 BLAST 比对，与 R. rask（CP010969）相似性为 99.4%。

【参考文献】：
期刊论文
[1]对福建省宁化林区鼠蜱类中斑点热群立克次体的检测[J]. 陈振光,陈敏,钟建平,毕德增.  中华预防医学杂志. 2002(02)



本文编号：3002079