病毒感染对角质形成细胞CCL20表达的影响及其机制

发布时间：2021-02-11 06:51

　　目的:既往研究发现,趋化因子CCL20在银屑病、白癜风等在内的多种自身免疫性皮肤疾病的病理过程中扮演了重要的角色,同时病毒感染也被认为是自身免疫性疾病的重要参与者。皮肤组织是机体抵御外界病原体的第一道屏障,其中角质形成细胞被认为在启动免疫中发挥了关键的作用。视黄酸诱导基因蛋白I（RIG-I）是固有免疫模式识别受体家族的重要成员,其能够被病毒复制的中间产物激活。然而,病毒感染是否会通过RIG-I信号通路影响角质形成细胞中CCL20的表达,进而参与自身免疫性皮肤疾病的病理过程仍不清楚。本文使用聚肌胞苷酸（Poly（I:C））来体外模拟病毒感染,探究病毒感染对皮肤角质形成细胞CCL20表达的影响,并且通过小干扰RNA沉默关键分子来探究相应的分子机制。方法:首先,体外细胞实验使用Poly（I:C）刺激角质形成细胞系HaCaT,通过Western-blot实验和qRT-PCR实验探究Poly（I:C）对HaCat中RIG-I表达的影响;接下来,通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）以及酶联免疫吸附测定实验（ELISA）检测Poly（I:C）对角质形成细胞CCL20分泌的影响;线粒体抗病毒信号蛋... 

【文章来源】：现代生物医学进展. 2020,20(10)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

Poly(I:C）通过RIG-I-MAVS信号通路介导CCL20的表达

NF-κB在MAVS下游发挥重要作用

Poly(I:C)是病毒复制中间产物双链RNA(double strand RNA,dsRNA)的类似物。RIG-I作为一种细胞质中的模式识别受体[10]，能够识别病毒复制中间产物，并且以正反馈的方式使得自身表达升高。所以我们首先使用0.1,0.15,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6μg/m L的Poly(I:C)分别作用于角质形成细胞，24小时后通过蛋白免疫印迹实验检测RIG-I的表达变化，发现Poly(I:C)以浓度依赖的方式促进RIG-I的表达，并且在0.6μg/m L时效果最显著(图1.A)。接下来，通过qRT-PCR实验证实在36小时内，0.6μg/m L Poly(I:C)能够显著的促进RIG-I m RNA水平的升高(图1.B)。这些数据表明，Poly(I:C）能够促进角质形成细胞RIG-I的表达。2.2 Poly(I:C）能够促进角质形成细胞CCL20的表达和分泌


本文编号：3028712