HBx通过Wnt/β-catenin通路促进HepG2细胞增殖

发布时间：2021-02-12 00:22

　　目的探讨Wnt/β-catenin通路在稳定表达乙型肝炎病毒x蛋白（HBx）的HepG2肝癌细胞增殖中的作用机制。方法验证前期构建的HepG2/HBx细胞株能稳定表达HBx蛋白。CCK-8法检测HepG2/HBx,HepG2/mock及HepG2 3组细胞增殖情况,RT-PCR及Western-blot法分别检测上述3种细胞中β-catenin mRNA和蛋白表达水平;最后检测β-catenin选择性抑制剂XAV939（20μmol/L）对各组细胞增殖水平的影响。结果前期构建的HepG2/HBx细胞株能稳定表达HBx蛋白。细胞增殖实验表明,HepG2/HBx组细胞增殖能力强于对照组（P<0.05）。RT-PCR及Western-blot检测结果显示,HepG2/HBx组细胞中β-catenin的mRNA及蛋白表达水平均高于对照组（P<0.05）,而HepG2/mock及HepG2组细胞之间则无明显差别。XAV939能够抑制各组细胞的增殖能力,HepG2/HBx组细胞在加入20μmol/L XAV939作用后的增殖速度较加入相同浓度DMSO的HepG2/HBx组细胞下降（P&... 

【文章来源】：福建医科大学学报. 2016,50(06)北大核心

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 细胞
        1.1.2 试剂
        1.1.3 仪器
    1.2 方法
        1.2.1 验证前期冻存的HepG2/HBx细胞稳定表达HBx基因
            1.2.1. 1 倒置荧光显微镜观察HepG2/HBx细胞株GFP蛋白表达情况
            1.2.1. 2 RT-PCR法鉴定HepG2/HBx细胞株的HBx mRNA表达情况
            1.2.1. 3 Western-blot法鉴定HepG2/HBx细胞株的HBx蛋白表达情况
        1.2.2 CCK-8法检测细胞增殖活性
        1.2.3 RT-PCR法检测细胞β-catenin mRNA表达
        1.2.4 Western-blot法检测细胞β-catenin蛋白表达
        1.2.5 XAV 939对细胞增殖的影响
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 前期冻存的HepG2/HBx细胞能稳定表达HBX基因
    2.2 HBx蛋白促进HepG2细胞增殖
    2.3 HBx蛋白上调HepG2细胞β-catenin mRNA与蛋白表达水平
    2.4 加入β-catenin抑制剂XAV 939后HepG2/HBx细胞增殖活性
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]Significance of hepatitis virus infection in the oncogenic initiation of hepatocellular carcinoma[J]. Caecilia HC Sukowati,Korri E El-Khobar,Susan I Ie,Beatrice Anfuso,David H Muljono,Claudio Tiribelli.  World Journal of Gastroenterology. 2016(04)
[2]Targeting Wnt/β-catenin pathway in hepatocellular carcinoma treatment[J]. Valery Vilchez,Lilia Turcios,Francesc Marti,Roberto Gedaly.  World Journal of Gastroenterology. 2016(02)
[3]Molecular mechanism of hepatitis B virus X protein function in hepatocarcinogenesis[J]. Ming Geng,Xuan Xin,Li-Quan Bi,Lu-Ting Zhou,Xiao-Hong Liu.  World Journal of Gastroenterology. 2015(38)
[4]环氧合酶-2在HL7702/HBx肝细胞增殖中的作用[J]. 李丹,方雪芬,郑碧云,陈治新,王小众.  福建医科大学学报. 2014(05)



本文编号：3029945