长脉宽1064nm Nd：YAG激光对红色毛癣菌的体外干预作用及机制研究
发布时间：2021-03-17 23:26
背景:甲真菌病（onychomycosis）是甲板、甲床和甲周围组织的真菌感染,占所有甲疾病的50%和所有皮肤感染的10%,是最常见的指（趾）甲疾病。大约90%的甲真菌病由皮肤癣菌引起,而皮肤癣菌中的红色毛癣菌是引起甲真菌病的最主要的病原菌。集体生活中的官兵队伍中足癣、甲真菌病等浅部真菌病的发病率和复发率很高。目前针对甲真菌病的传统治疗方法存在疗效不好或者用药后发生不良反应的风险高等局限性,不适合孕妇、哺乳期妇女、肝肾功能障碍、药物不耐受的老年人、飞行员等特殊人群。随着激光医学的不断发展,激光治疗甲真菌病由于其安全、有效、无毒副作用等优势备受瞩目,长脉宽1064nmNd:YAG激光就是常用的治疗甲真菌病的激光设备之一。但也有一些研究发现使用不同脉宽（调Q、亚毫秒、毫秒）的1064nm Nd:YAG激光体外照射红色毛癣菌菌落,却未能抑制其生长,存在争议。而且激光治疗甲真菌病的具体机制尚不清楚。研究发现ROS和硝基化产物是抑制/杀灭红色毛癣菌生长的重要物质,在光动力疗法对红色毛癣菌的体外生长抑制作用中发挥作用。研究发现活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）介导的...
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同脉冲数干预后菌落面积的变化
11对照组，5次脉冲激光组、9次脉冲激光组、11次脉冲激光组，13次脉冲激光组，15次脉冲激光组菌落经不同干预后在光照前、光后第1、3、5、7天的菌落变化，余参数为能量密度160J/cm2，脉宽40ms，频率1HZ,光斑直径为7mm。图2.不同脉冲数干预后菌落生长曲线对照组，5次脉冲激光组、9次脉冲激光组、11次脉冲激光组，13次脉冲激光组，15次脉冲激光组菌落经不同干预后在光照前、光照后第1、3、5、7天的生长曲线，其余参数为能量密度160J/cm2，脉宽40ms，频率1HZ,光斑直径为7mm；各脉冲激光组的菌落面积在光照后不同时间点的菌落面积均小于对照组对应时间点的面积，**P<0.01。4.2长脉宽1064nmNd:YAG激光作用下红色毛癣菌光镜下形态结构改变对照组不处理，激光组孢子悬液在160J/cm2，脉宽40ms，频率1HZ,光斑直径7mm，选择9次脉冲垂直照射（5次脉冲干预24h后仍有肉眼可见菌落生长，故选9次），28℃孵育24h后，对照组和激光组分别用乳酸酚棉兰和钙荧光白染色后，在普通光学显微镜和倒置荧光显微镜下观察，都可看出对照组菌丝纤细顺滑，形态正常，而激光组菌丝膨胀粗糙，失去了正常形态结构（图3）。提示光镜下观察长脉宽1064nmNd:YAG激光对红色毛癣菌的结构有破坏作用。
12图3.不同干预后红色毛癣菌镜下形态结构改变A、B为对照组和激光组经乳酸酚棉兰染色后光镜下的图片（400）；C、D为对照组和激光组经钙荧光白染色后荧光显微镜下的图片（400）。4.3长脉宽1064nmNd:YAG激光不同脉冲数干预红色毛癣菌的活力变化不同脉冲数激光干预红色毛癣菌孢子悬液6h后，比较各处理组之间的相对活力发现P<0.01,差异有统计学意义,提示各组孢子悬液间的相对活力有差异。同时5次脉冲激光组与对照组相比，P=0.287，>0.05,差异无统计学意义，孢子悬液经5次脉冲激光照射后的相对活力与对照组无差异。9次和11次脉冲激光组与对照组相比，二者P均<0.01,差异有统计学意义，孢子悬液经9次、11次脉冲激光照射后的相对活力均下降，均小于未照射组，取9次做后续实验。9次、11次脉冲激光组与5次脉冲激光组相比，二者P均<0.01，差异有统计学意义，孢子悬液经9次、11次脉冲激光照射后的相对活力均小于5次脉冲激光组。可以看出，长脉宽1064nmNd:YAG激光对红色毛癣菌孢子悬液的活力有抑制/杀灭作用（图4）。
本文编号：3087899
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同脉冲数干预后菌落面积的变化
11对照组，5次脉冲激光组、9次脉冲激光组、11次脉冲激光组，13次脉冲激光组，15次脉冲激光组菌落经不同干预后在光照前、光后第1、3、5、7天的菌落变化，余参数为能量密度160J/cm2，脉宽40ms，频率1HZ,光斑直径为7mm。图2.不同脉冲数干预后菌落生长曲线对照组，5次脉冲激光组、9次脉冲激光组、11次脉冲激光组，13次脉冲激光组，15次脉冲激光组菌落经不同干预后在光照前、光照后第1、3、5、7天的生长曲线，其余参数为能量密度160J/cm2，脉宽40ms，频率1HZ,光斑直径为7mm；各脉冲激光组的菌落面积在光照后不同时间点的菌落面积均小于对照组对应时间点的面积，**P<0.01。4.2长脉宽1064nmNd:YAG激光作用下红色毛癣菌光镜下形态结构改变对照组不处理，激光组孢子悬液在160J/cm2，脉宽40ms，频率1HZ,光斑直径7mm，选择9次脉冲垂直照射（5次脉冲干预24h后仍有肉眼可见菌落生长，故选9次），28℃孵育24h后，对照组和激光组分别用乳酸酚棉兰和钙荧光白染色后，在普通光学显微镜和倒置荧光显微镜下观察，都可看出对照组菌丝纤细顺滑，形态正常，而激光组菌丝膨胀粗糙，失去了正常形态结构（图3）。提示光镜下观察长脉宽1064nmNd:YAG激光对红色毛癣菌的结构有破坏作用。
12图3.不同干预后红色毛癣菌镜下形态结构改变A、B为对照组和激光组经乳酸酚棉兰染色后光镜下的图片（400）；C、D为对照组和激光组经钙荧光白染色后荧光显微镜下的图片（400）。4.3长脉宽1064nmNd:YAG激光不同脉冲数干预红色毛癣菌的活力变化不同脉冲数激光干预红色毛癣菌孢子悬液6h后，比较各处理组之间的相对活力发现P<0.01,差异有统计学意义,提示各组孢子悬液间的相对活力有差异。同时5次脉冲激光组与对照组相比，P=0.287，>0.05,差异无统计学意义，孢子悬液经5次脉冲激光照射后的相对活力与对照组无差异。9次和11次脉冲激光组与对照组相比，二者P均<0.01,差异有统计学意义，孢子悬液经9次、11次脉冲激光照射后的相对活力均下降，均小于未照射组，取9次做后续实验。9次、11次脉冲激光组与5次脉冲激光组相比，二者P均<0.01，差异有统计学意义，孢子悬液经9次、11次脉冲激光照射后的相对活力均小于5次脉冲激光组。可以看出，长脉宽1064nmNd:YAG激光对红色毛癣菌孢子悬液的活力有抑制/杀灭作用（图4）。
本文编号：3087899
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