间日疟原虫输出蛋白PvEXP100参与宿主免疫逃避的机制及其在抗肿瘤治疗中的探究

发布时间：2021-04-08 01:30

　　疟疾是世界上严重影响人类健康的公共卫生问题之一。由于疟原虫的免疫逃避,虫体在有免疫力的宿主体内仍能生存与繁殖,导致宿主产生的免疫保护不稳定。因此,研究疟原虫的免疫逃避机制对疟疾的预防和治疗具有重要意义。研究表明疟原虫的免疫逃避可能与输出蛋白和脾脏中的成纤维细胞相互作用有关。在筛选间日疟原虫未知蛋白发现PvEXP100（Plasmodium vivax exported protein 100）是间日疟原虫的输出蛋白之一,在此基础上观察PvEXP100对人脾脏成纤维细胞（human spleen fibroblasts,HSF）的作用,从而揭示间日疟原虫在脾脏中免疫逃避的机制。主要内容及结果如下:（1）PvEXP100功能区的筛选。构建重组质粒pEGFP-HSVg-D1-PvEXP100,转染至HEK293T细胞表达。通过Transwell观察PvEXP100对人脾脏成纤维细胞（HSF）迁移的作用,F1段能够引起HSF的大量迁移。构建原核表达重组质粒pET30a-PvEXP100-F1,得到纯蛋白进行后续实验。（2）PvEXP100-F1对HSF的作用。利用CCK-8法观察PvEXP10... 

【文章来源】：江南大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

间日疟原虫的生活史[4]

江南大学硕士学位论文6图1-4 肿瘤微环境中 TAMs 的极化状态对肿瘤的影响[34]Figure 1-4 Targeting TAMs to disrupt or normalize tumor vasculature[34]综上所述，疟原虫可能通过引起机体的免疫应答间接产生抗肿瘤的效应。因此本课题组提出猜想，输出蛋白由于能够输出到红细胞膜表面，暴露于膜外能够引起机体的免疫应答从而起到间接抗肿瘤的作用。1.4 间日疟原虫输出蛋白的前期研究疟原虫的输出蛋白由于输出到红细胞膜表面，暴露于膜外区域，除了引起机体的免疫应答外，也会与正常红细胞结合形成rosettes，使血流速度降低并且在血管内皮上黏附，避免虫体随着血液循环到达脾脏而被识别清除。Rosettes形成的部位通常是低氧环境，有利于虫体的繁殖[39]。脾脏是人体最大的免疫器官，当出现病原入侵、红细胞异常等因素下呈亢进状态

1-6 PvEXP100与间日疟患者血清发生特异性的抗原-抗体结合反 The reaction between PvEXP100 and the serum of Plasmodium vi外周血获得的受染红细胞用PvEXP100抗体孵育后，用并用蓝色荧光核染料DAPI标记原虫，通过激光共聚焦出到红细胞表面（图 1-7）。

【参考文献】：
期刊论文
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[3]间日疟原虫入侵红细胞的相关蛋白研究进展[J]. 张馨心,楚瑞林,玄英花,程洋.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2018(02)
[4]Cyclin D1与细胞周期调控[J]. 卢梦玲,闫超,赖多,徐汉虹.  生物技术通报. 2011(10)
[5]MAPK信号通路研究进展[J]. 陈建勇,王聪,王娟,曹礼荣.  中国医药科学. 2011(08)
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博士论文
[1]K5多糖硫酸化衍生物在内皮祖细胞分化和肿瘤血管形成中的作用及其机制研究[D]. 付海田.江南大学 2018

硕士论文
[1]弓形虫效应分子GRA15Ⅱ诱导巨噬细胞极化抗小鼠肝癌的研究[D]. 李源玲.安徽医科大学 2017
[2]TIP样蛋白在疟原虫免疫抑制中功能的初步研究[D]. 黄豫晓.第四军医大学 2013



本文编号：3124584