一种乙肝病毒类核衣壳快速检测体系

发布时间：2021-05-16 14:47

　　目的:以乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）核衣壳为靶点的药物筛选,目前尚缺乏简便有效的筛选细胞模型。直接检测核衣壳的方法中相对简便可靠的是非变性琼脂糖凝胶电泳（Native agarose gel electrophoresis,NAGE）。对于药物筛选而言,NAGE存在通量低和操作繁琐的问题。针对这些问题,设计构建一种新的类核衣壳快速检测体系。方法:将近红外荧光蛋白（Near-Infrared fluorescent protein,NIRFP）通过长的柔性接头融合到乙型肝炎病毒核心蛋白（Hepatitis B virus core protein,HBc）上,转染细胞并检测红外荧光蛋白表达以及类核衣壳结构形成情况;制备重组慢病毒,构建四环素调控转录因子稳定表达细胞系293tTA,并以此细胞为基础,构建miRFP709-HBc稳定表达细胞系并筛选单克隆;用已知具有抑制HBV核衣壳形成的药物Bay 41-4109和Arbidol处理细胞,检测类核衣壳的变化,以测试该细胞模型用于药物筛选的可行性。结果:（1）两种近红外荧光蛋白与HBc融合表达时,miRFP709-... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：39 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
英汉缩略语名词对照
摘要
ABSTRACT
前言
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
参考文献
全文总结
文献综述：靶向HBV核衣壳装配的小分子化合物研究进展
    参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]Management of antiviral drug resistance in chronic hepatitis B[J]. Ki Bae Bang,Hong Joo Kim.  World Journal of Gastroenterology. 2014(33)



本文编号：3189885