乙型肝炎病毒促进中性粒细胞存活和激活并导致NK细胞功能损伤
发布时间：2021-06-22 22:08
背景:HBV是一种嗜肝性DNA病毒,HBV感染不会引起直接的肝细胞病变。宿主免疫应答决定了病毒能否被清除以及肝脏疾病的发展。中性粒细胞是人类最丰富的循环白细胞,与其他白细胞相比,它的寿命相对较短。作为抗感染的第一道防线,中性粒细胞表现出强大的抗细菌和抗真菌作用。然而,中性粒细胞在病毒感染中的作用一直被忽视。大量临床研究发现,慢性乙型肝炎患者中性粒细胞数量显著高于健康对照组,并与肝脏炎症和肝损伤相关。但慢性HBV感染患者中性粒细胞增多的机制及其作用尚不清楚。方法:收集初治的慢性HBV感染患者的临床资料,分析中性粒细胞与HBV及其抗原之间的相关性。从健康人外周血中分离中性粒细胞,在HBV和表面抗原存在的条件下,单独培养或与自体的PBMC、T淋巴细胞以及NK细胞共培养。通过Annexin V和7AAD双染色、TUNEL和形态学观察检测中性粒细胞的凋亡;通过Western blot和实时定量PCR验证HBV抑制中性粒细胞凋亡的信号途径。通过检测细胞表面分子、细胞因子、活性氧以及细胞外诱捕网等指标,反映中性粒细胞的活化状态。通过流式细胞术检测T淋巴细胞和NK细胞的凋亡、增殖和功能（包括脱颗粒效应...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
基本研究思路
第3章结果25间的相关性。如图3.1所示，spearman相关性分析显示中性粒细胞绝对值与HBVDNA及HBsAg均为正相关关系，相关系数分别为0.317（P=0.011）、0.332（P=0.007）。这提示HBV和HBsAg是导致慢性HBV感染患者中性粒细胞增多的可能因素。图3.1慢性HBV感染患者中性粒细胞与HBV及其抗原的相关性研究。收集64例慢性HBV感染患者的临床数据，进行相关性分析。（A）中性粒细胞与HBVDNA相关性分析。（B）中性粒细胞与HBsAg相关性分析。3.2HBV和表面抗原抑制中性粒细胞的自发凋亡中性粒细胞本质上是短寿命的吞噬细胞，发生组成性凋亡。因此推测HBV可能通过影响中性粒细胞的凋亡，导致慢性HBV感染患者中性粒细胞增多。为了验证这一假设，用HBV或HBV表面抗原处理中性粒细胞并进行体外培养，采用了三种试验方法来评估HBV对中性粒细胞凋亡的影响。在正式开始实验之前，对分离纯化的中性粒细胞进行纯度鉴定。根据2.2中实验方法从浓缩白细胞中分离中性粒细胞，取少量细胞进行流式检测。未经纯化的浓缩白细胞经红细胞裂解处理后，进行流式检测作为对照。如图3.2所示，纯化前的浓缩白细胞中除中性粒细胞外还含有其他细胞成分，其中中性粒细胞占61%。分离纯化后的中性粒细胞纯度在90%以上，可用于后续试验。图3.2中性粒细胞纯度鉴定。
第3章结果25间的相关性。如图3.1所示，spearman相关性分析显示中性粒细胞绝对值与HBVDNA及HBsAg均为正相关关系，相关系数分别为0.317（P=0.011）、0.332（P=0.007）。这提示HBV和HBsAg是导致慢性HBV感染患者中性粒细胞增多的可能因素。图3.1慢性HBV感染患者中性粒细胞与HBV及其抗原的相关性研究。收集64例慢性HBV感染患者的临床数据，进行相关性分析。（A）中性粒细胞与HBVDNA相关性分析。（B）中性粒细胞与HBsAg相关性分析。3.2HBV和表面抗原抑制中性粒细胞的自发凋亡中性粒细胞本质上是短寿命的吞噬细胞，发生组成性凋亡。因此推测HBV可能通过影响中性粒细胞的凋亡，导致慢性HBV感染患者中性粒细胞增多。为了验证这一假设，用HBV或HBV表面抗原处理中性粒细胞并进行体外培养，采用了三种试验方法来评估HBV对中性粒细胞凋亡的影响。在正式开始实验之前，对分离纯化的中性粒细胞进行纯度鉴定。根据2.2中实验方法从浓缩白细胞中分离中性粒细胞，取少量细胞进行流式检测。未经纯化的浓缩白细胞经红细胞裂解处理后，进行流式检测作为对照。如图3.2所示，纯化前的浓缩白细胞中除中性粒细胞外还含有其他细胞成分，其中中性粒细胞占61%。分离纯化后的中性粒细胞纯度在90%以上，可用于后续试验。图3.2中性粒细胞纯度鉴定。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Inflammation scores predict survival for hepatitis B virus-related hepatocellular carcinoma patients after transarterial chemoembolization[J]. Dong-Sheng Zhou,Li Xu,Yao-Ling Luo,Feng-Ying He,Jun-Ting Huang,Yao-Jun Zhang,Min-Shan Chen. World Journal of Gastroenterology. 2015(18)
[2]Neutrophil-lymphocyte ratio predicts the prognosis of patients with hepatocellular carcinoma after liver transplantation[J]. Guang-Qin Xiao,Chang Liu,Da-Li Liu,Jia-Yin Yang,Lu-Nan Yan. World Journal of Gastroenterology. 2013(45)
本文编号：3243612
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
基本研究思路
第3章结果25间的相关性。如图3.1所示，spearman相关性分析显示中性粒细胞绝对值与HBVDNA及HBsAg均为正相关关系，相关系数分别为0.317（P=0.011）、0.332（P=0.007）。这提示HBV和HBsAg是导致慢性HBV感染患者中性粒细胞增多的可能因素。图3.1慢性HBV感染患者中性粒细胞与HBV及其抗原的相关性研究。收集64例慢性HBV感染患者的临床数据，进行相关性分析。（A）中性粒细胞与HBVDNA相关性分析。（B）中性粒细胞与HBsAg相关性分析。3.2HBV和表面抗原抑制中性粒细胞的自发凋亡中性粒细胞本质上是短寿命的吞噬细胞，发生组成性凋亡。因此推测HBV可能通过影响中性粒细胞的凋亡，导致慢性HBV感染患者中性粒细胞增多。为了验证这一假设，用HBV或HBV表面抗原处理中性粒细胞并进行体外培养，采用了三种试验方法来评估HBV对中性粒细胞凋亡的影响。在正式开始实验之前，对分离纯化的中性粒细胞进行纯度鉴定。根据2.2中实验方法从浓缩白细胞中分离中性粒细胞，取少量细胞进行流式检测。未经纯化的浓缩白细胞经红细胞裂解处理后，进行流式检测作为对照。如图3.2所示，纯化前的浓缩白细胞中除中性粒细胞外还含有其他细胞成分，其中中性粒细胞占61%。分离纯化后的中性粒细胞纯度在90%以上，可用于后续试验。图3.2中性粒细胞纯度鉴定。
第3章结果25间的相关性。如图3.1所示，spearman相关性分析显示中性粒细胞绝对值与HBVDNA及HBsAg均为正相关关系，相关系数分别为0.317（P=0.011）、0.332（P=0.007）。这提示HBV和HBsAg是导致慢性HBV感染患者中性粒细胞增多的可能因素。图3.1慢性HBV感染患者中性粒细胞与HBV及其抗原的相关性研究。收集64例慢性HBV感染患者的临床数据，进行相关性分析。（A）中性粒细胞与HBVDNA相关性分析。（B）中性粒细胞与HBsAg相关性分析。3.2HBV和表面抗原抑制中性粒细胞的自发凋亡中性粒细胞本质上是短寿命的吞噬细胞，发生组成性凋亡。因此推测HBV可能通过影响中性粒细胞的凋亡，导致慢性HBV感染患者中性粒细胞增多。为了验证这一假设，用HBV或HBV表面抗原处理中性粒细胞并进行体外培养，采用了三种试验方法来评估HBV对中性粒细胞凋亡的影响。在正式开始实验之前，对分离纯化的中性粒细胞进行纯度鉴定。根据2.2中实验方法从浓缩白细胞中分离中性粒细胞，取少量细胞进行流式检测。未经纯化的浓缩白细胞经红细胞裂解处理后，进行流式检测作为对照。如图3.2所示，纯化前的浓缩白细胞中除中性粒细胞外还含有其他细胞成分，其中中性粒细胞占61%。分离纯化后的中性粒细胞纯度在90%以上，可用于后续试验。图3.2中性粒细胞纯度鉴定。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Inflammation scores predict survival for hepatitis B virus-related hepatocellular carcinoma patients after transarterial chemoembolization[J]. Dong-Sheng Zhou,Li Xu,Yao-Ling Luo,Feng-Ying He,Jun-Ting Huang,Yao-Jun Zhang,Min-Shan Chen. World Journal of Gastroenterology. 2015(18)
[2]Neutrophil-lymphocyte ratio predicts the prognosis of patients with hepatocellular carcinoma after liver transplantation[J]. Guang-Qin Xiao,Chang Liu,Da-Li Liu,Jia-Yin Yang,Lu-Nan Yan. World Journal of Gastroenterology. 2013(45)
本文编号：3243612
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/chuanranbingxuelunwen/3243612.html
最近更新
教材专著
