MicroRNA200a抑制TGF-β诱导的血吸虫肝纤维化的研究

发布时间：2021-06-25 00:58

　　[目的]研究MicroRNA200a（miR-200a）对TGF-β诱导人肝星状细胞（LX-2）活化与增殖的作用,探讨miR-200a抑制TGF-β改善血吸虫病肝纤维化的机制。[方法]细胞实验选用LX-2,将细胞培养至对数生长期,采用不同浓度（0、5、10、15ng/mL）的TGF-β1在不同时间点（0、24、48、72小时）刺激LX-2,用试剂盒提取细胞总RNA及蛋白,荧光定量PCR方法检测LX-2中miR-200a、α-SMA、Colla I、TGF-β2的mRNA;western-blot方法检测LX-2中TGF-β2的蛋白表达;MTT法检测细胞增殖率。用上述实验中获得的TGF-β1最佳刺激浓度5ng/mL及最佳刺激时间48小时进行后续实验。构建miR-200a mimics相关质粒,利用瞬时转染技术,分别将各质粒转染至LX-2细胞中,细胞实验分组为:PBS组、TGF-β1组、miR-200a mimics组、miR-200a mimics NC组、miR-200a inhibitor组及miR-200a inhibitor NC组共六组,孵育6小时后,除PBS组外,其它各组加入... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

qRT-PCR检测不同时间TGF-β1对LX-2细胞中miR-200a表达水平的影响

4.2 qRT-PCR 检测不同浓度 TGF-β1 对 LX-2 细胞中 miR-200a 表达水平的igure 4.2 The effect of different concentrations TGF-β1 on the expression levelmiR-200a in LX-2 cells were identified by qRT-PCR.*: P<0.05 vs 0ng/ml groupGF-β1 激活 LX-2 后纤维化因子的表达情况同浓度（0、5、10、15ng/mL）的 TGF-β1 分别加入 LX-2 细胞中培量 PCR 检测，结果显示：随着 TGF-β1 浓度增加，α-SMA mRNA渐上升，各 TGF-β1 浓度组与 0ng/mL 组比较，有统计学意义（PmL 至 15ng/mL 之间 α-SMA mRNA 的表达水平无显著性差异（图

4.2 qRT-PCR 检测不同浓度 TGF-β1 对 LX-2 细胞中 miR-200a 表达水平的影igure 4.2 The effect of different concentrations TGF-β1 on the expression levels omiR-200a in LX-2 cells were identified by qRT-PCR.*: P<0.05 vs 0ng/ml groupGF-β1 激活 LX-2 后纤维化因子的表达情况同浓度（0、5、10、15ng/mL）的 TGF-β1 分别加入 LX-2 细胞中培养量 PCR 检测，结果显示：随着 TGF-β1 浓度增加，α-SMA mRNA 的渐上升，各 TGF-β1 浓度组与 0ng/mL 组比较，有统计学意义（P<0mL 至 15ng/mL 之间 α-SMA mRNA 的表达水平无显著性差异（图

【参考文献】：
期刊论文
[1]肝纤维化的细胞分子机制研究进展[J]. 涂传涛,王吉耀.  中华肝脏病杂志. 2014 (01)
[2]转化生长因子β1和结缔组织生长因子在小鼠血吸虫病肝纤维化中的表达[J]. 黄加权,朱俊,李兰,焦云桃,徐蕾,陶然,范翔雪,马科,郭威,宁琴.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2012(01)
[3]认识肝纤维化与晚期血吸虫病的过去与未来[J]. 蔡卫民.  中国血吸虫病防治杂志. 2008(03)

博士论文
[1]肝纤维化相关microRNA的筛选及其功能研究[D]. 陈超.第二军医大学 2012

硕士论文
[1]上调宿主microRNA-203对血吸虫病肝纤维化的影响[D]. 赛雪.第二军医大学 2013



本文编号：3248169