CRISPR/Cas系统与志贺菌耐药的关系

发布时间：2021-07-02 17:43

　　志贺菌属是感染性腹泻的主要病原体之一,引起菌痢。目前,菌痢的治疗主要依赖于抗生素,随着抗生素的滥用,志贺菌频繁变异,不断产生耐药株,基因的水平转移（horizontal gene transfer,HGT）是细菌获得耐药性的主要方式。研究发现成簇的规律间隔的短回文重复序列（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR）广泛存在于细菌和古细菌的基因组中,其由重复序列（repeat）和间隔序列（spacer）构成,与cas（CRIPSPR associated）组成CRISPR/Cas系统,靶向裂解侵入的外源基因,限制HGT。目的本研究通过检测志贺菌的CRISPR/Cas系统、耐药表型及耐药基因,分析CRISPR/Cas系统与耐药的关系;并分析接合转移及诱导耐药前后CRISPR/Cas系统的变化,为深入阐明志贺菌中CRISPR/Cas系统对耐药的调控提供依据。方法复苏并鉴定实验室保存的59株志贺菌,改良Kirby-Bauer法检测耐药表型、PCR扩增耐药基因、cas,PCR扩增CRISPR并测序,CRISP... 

【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

耐药基因的PCR扩增产物

15图 3.2 sul1 和 qnrA 的 PCR 扩增产物DNAmark；1、2 和 3：qnrA，823bp；4、5 和 6：sul1，822bp因 tem、oxa、 tetA、 tetB、 sul1、 sul2、 cat 和 qnrA 在见表 3.2。其中，所检测的 59 株志贺菌均携带 β-内酰胺外一种 β-内酰胺类耐药基因 oxa 的阳性率相对较低，为 59因 tetA 和 tetB 阳性率均较高，分别为 86.44%和 84.75%l1 的阳性率较高，为 89.83%，而 sul2 的阳性率相对较低，为cat及喹诺酮类耐药基因qnrA 的阳性率亦较高，分别为83.0

结果 合转移多耐药前后志贺菌 CRISPR/Cas 系统的变化 接合转移各菌株中 CRISPR/Cas 系统的 PCR 扩增结果敏感株 mel-sf-1998023/zz 中 CRISPR/Cas 系统的 PCR 扩增结果R 分别扩增出敏感志贺菌株 mel-sf-1998023/zz（接合转移受体3 及 cas1、cas2 基因，CRISPR1、CRISPR2 及 cas3、cse1、csecas7 均未扩增出，如图 3.3。

【参考文献】：
期刊论文
[1]儿童福氏志贺菌超广谱β内酰胺酶CTX-M基因型的研究[J]. 高春燕,刘树平,高庆双,王瑶.  中国热带医学. 2012(01)
[2]大肠埃希菌多重耐药性的形成机制[J]. 吕殿红,曾振灵,陈杖榴,蒋红霞.  动物医学进展. 2007(07)
[3]稳定、无抗药的痢疾福氏2a和宋内双价菌苗候选株的构建[J]. 芮贤良,徐永强,王红,苏国富,黄翠芬.  生物工程学报. 1996(02)
[4]插入序列IS2的研究──Ⅱ．突变体的极性效应和DNA序列分析[J]. 黄占景.  遗传学报. 1996(02)

博士论文
[1]ISEcpl介导志贺菌耐药的分子基础研究[D]. 王颖芳.郑州大学 2013

硕士论文
[1]志贺菌中CRISPR的分布及其结构特征[D]. 薛泽润.郑州大学 2014
[2]志贺菌属细菌耐药相关质粒的耐药性研究[D]. 侯瑞娟.郑州大学 2012
[3]志贺菌主动外排泵acrAB-tolC及调控基因marOR突变与耐药的关系[D]. 任静朝.郑州大学 2010
[4]临床分离志贺菌属细菌膜耐药机制的研究[D]. 徐瑾.郑州大学 2005



本文编号：3260924