乙型病毒性肝炎肝硬化患者肠道黏膜屏障功能与微生态的研究
发布时间：2021-07-07 12:29
目的:通过研究乙型病毒性肝炎肝硬化（以下简称乙肝肝硬化）患者肠道黏膜屏障功能及微生态变化情况并与健康人群进行比较,探讨肠道菌群结构的改变与乙肝肝硬化发展的关系,阐述其临床意义。方法:收集75例乙肝肝硬化患者外周血与新鲜粪便,并按照病情严重程度分为代偿期组28例,失代偿期组47例,同时收集20例健康人群外周血与新鲜粪便进行检测。采用酶法对肠道屏障功能的生化指标二胺氧化酶（DAO）,D-乳酸和内毒素含量进行检测。对样本肠道细菌进行16srDNA序列Illumina Miseq测序,分析比较三组组内与组间肠道屏障功能与菌群结构差异,并对肠道物种多样性进行分析。结果:乙肝肝硬化代偿期组与失代偿期组患者DAO,D-乳酸和内毒素含量较对照组均升高（2.49±2.13vs2.89±1.36vs2.14±1.01,10.35±3.12vs14.22±2.04vs8.11±3.44,5.12±1.38vs6.38±1.31vs4.22±2.10;P<0.05）;乙肝肝硬化代偿期组与失代偿期组患者的肝功能水平指标ALT与AST均与DAO,D-乳酸和内毒素成正相关（r=0.416,r=0.360,r=...
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
乙肝肝硬化代偿期，失代偿期组患者与健康人群肠道微生态OTUVenn图
兰州大学硕士学位论文乙型病毒性肝炎肝硬化患者肠道黏膜屏障功能与微生态的研究20分别为70.98%，64.27%和58.73%及19.48%，24.53%和29.22%,差异无统计学意义（P＞0.05）。3.3.2.2属水平在属分类等级水平上，我们共鉴定出300余种细菌（图2-2），占比较高的前十菌属为拟杆菌属（Bacteroides）粪杆菌属（Faecalibacterium）巨单胞菌属（Megamonas）普氏菌属(Prevotella9)韦荣球菌属（Veillonella）大肠杆菌属-志贺菌属（EscherichiaShigella）罗斯氏菌属（Roseburia）直肠真杆菌属(Eubacteriumrectale)链球菌属（Streptococcus）和Lachnoclostridium。其中占比最高的为拟杆菌属，占总比的16.59%，其次为粪杆菌和巨单胞菌属，分别占总比的11.51%和8.74%。而普氏菌属，韦荣球菌属，大肠杆菌属-志贺菌属和罗斯氏菌属等比例较低，均占比小于5.00%。在对照组中，巨单胞菌属，拟杆菌属和粪杆菌属比例较高，分别为15.23%，11.65%和10.13%，乙肝肝硬化代偿期组拟杆菌属，粪杆菌属和巨单胞菌属比例较高，分别为13.62%，11.73%和10.41%，失代偿期组拟杆菌属，粪杆菌属和韦荣球菌属占比较高，分别为18.50%，9.91%和8.69%。拟杆菌属组间差异有统计学意义（P＜0.05），粪杆菌属无统计学意义（P＞0.05）。图2-1乙肝肝硬化代偿期，失代偿期组患者与健康人群门水平肠道微生态群落结构组分图Fig.2-1ThecompositiondiagramofintestinalmicroecologicalcommunitystructureatthelevelofphyluminpatientswithcompensatoryanddecompensatedhepatitisBcirrhosisandhealthypeople
兰州大学硕士学位论文乙型病毒性肝炎肝硬化患者肠道黏膜屏障功能与微生态的研究21图2-2乙肝肝硬化代偿期，失代偿期组患者与健康人群属水平肠道微生态群落结构组分图Fig.2-2ThecompositiondiagramofintestinalmicroecologicalcommunitystructureatthelevelofgenusinpatientswithcompensatoryanddecompensatedhepatitisBcirrhosisandhealthypeople3.3.3样本多样性分析结果3.3.3.1分组多样性指数分析研究发现，对照组chao指数显著高于乙肝肝硬化代偿期组和乙肝肝硬化失代偿期，差异有统计学意义（P＜0.05）。因此，与健康人群相比，肝硬化失代偿期患者肠道菌群丰度明显降低，且乙肝肝硬化失代偿期组患者肠道菌群丰度低于代偿期患者。经方差分析，对照组shannon指数高于乙肝肝硬化失代偿期组，差异有统计学意义（P＜0.05）；对照组Simpson指数低于肝硬化代偿期和失代偿期，差异无统计学意义（P＞0.05）（表4）。表6乙肝肝硬化代偿期，失代偿期组患者与组健康人群肠道菌群丰度与多样性比较Tab.6ComparisonofintestinalfloraabundanceanddiversitybetweenpatientswithhepatitisBcirrhosisanddecompensatedpatients3.3.3.2稀释曲线和Shannon-Wiener曲线由上述说明已经得知，可用序列数做横轴，OTU的数目做纵轴，形成生物群落稀释曲线图（图3）。同样，利用mothur软件计算不同随机抽样下的shannon值构建Shannon-Wiener曲线（图4），每条曲线代表一个样本。由图中可以看出，随着测序条数的增加，稀释曲线和Shannon-Wiener曲线均趋于平坦，说明测序结果可反映样本菌群多样性，可进行进一步分析。组别健康对照组乙肝肝硬化代偿期组乙肝肝硬化失代偿期组PChao1253.47±114.631021.52±113.47912.43±67.84＜0.05Shannon3.73±0.643.45±0.043.29±
【参考文献】：
期刊论文
[1]3种评分系统对肝硬化胃底食管静脉曲张出血患者预后的预测价值[J]. 余维微,蔡宗宗,曾耀明,叶影,朱小区. 重庆医学. 2020(10)
[2]丙氨酰谷氨酰胺及双歧杆菌三联活菌胶囊在结直肠癌术后辅助化疗中对肠道屏障功能的影响[J]. 杨洋,赵勇. 中国现代医学杂志. 2020(15)
[3]肠道微生态与生命早期健康[J]. 黄毅溦,蔡美琴. 中国微生态学杂志. 2019(02)
[4]益生菌治疗胆汁淤积性肝病的效果及对肠道菌群、血氨、总胆汁酸、TGF-β1和TNF-α水平的影响[J]. 严海燕,李小芹,周方. 医药论坛杂志. 2018(12)
[5]健康幼儿大便悬液灌肠治疗肠道菌群失调1例[J]. 田威. 世界最新医学信息文摘. 2018(93)
[6]慢性乙型肝炎、肝硬化和肝衰竭患者肠道菌群变化研究[J]. 郑婷婷,蒋珊珊,方钟燎,陈茂伟. 实用肝脏病杂志. 2018(06)
[7]乙肝肝硬化与乙肝肝硬化合并糖尿病患者肠道菌群结构初步探讨[J]. 龙克娇,刘保文,卢敏,冯瑞亚,韩涛,向慧玲. 世界华人消化杂志. 2018(16)
[8]肠道微生态研究方法及应用研究进展[J]. 杨波,铁宝霞,蔡小玲,曾通旭,徐倩,哈小琴. 广西医学. 2018(10)
[9]BioCliM指数对食管胃底静脉曲张出血内镜下治疗后1年和2年预后的预测价值[J]. 沈玲燕,王彩芽,周贤斌,叶丽萍,何赛琴,张玉. 中华消化杂志. 2018 (04)
[10]肠道微生态医学研究进展概述[J]. 甄建华,于河,谷晓红. 中华中医药杂志. 2017(07)
本文编号：3269635
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
乙肝肝硬化代偿期，失代偿期组患者与健康人群肠道微生态OTUVenn图
兰州大学硕士学位论文乙型病毒性肝炎肝硬化患者肠道黏膜屏障功能与微生态的研究20分别为70.98%，64.27%和58.73%及19.48%，24.53%和29.22%,差异无统计学意义（P＞0.05）。3.3.2.2属水平在属分类等级水平上，我们共鉴定出300余种细菌（图2-2），占比较高的前十菌属为拟杆菌属（Bacteroides）粪杆菌属（Faecalibacterium）巨单胞菌属（Megamonas）普氏菌属(Prevotella9)韦荣球菌属（Veillonella）大肠杆菌属-志贺菌属（EscherichiaShigella）罗斯氏菌属（Roseburia）直肠真杆菌属(Eubacteriumrectale)链球菌属（Streptococcus）和Lachnoclostridium。其中占比最高的为拟杆菌属，占总比的16.59%，其次为粪杆菌和巨单胞菌属，分别占总比的11.51%和8.74%。而普氏菌属，韦荣球菌属，大肠杆菌属-志贺菌属和罗斯氏菌属等比例较低，均占比小于5.00%。在对照组中，巨单胞菌属，拟杆菌属和粪杆菌属比例较高，分别为15.23%，11.65%和10.13%，乙肝肝硬化代偿期组拟杆菌属，粪杆菌属和巨单胞菌属比例较高，分别为13.62%，11.73%和10.41%，失代偿期组拟杆菌属，粪杆菌属和韦荣球菌属占比较高，分别为18.50%，9.91%和8.69%。拟杆菌属组间差异有统计学意义（P＜0.05），粪杆菌属无统计学意义（P＞0.05）。图2-1乙肝肝硬化代偿期，失代偿期组患者与健康人群门水平肠道微生态群落结构组分图Fig.2-1ThecompositiondiagramofintestinalmicroecologicalcommunitystructureatthelevelofphyluminpatientswithcompensatoryanddecompensatedhepatitisBcirrhosisandhealthypeople
兰州大学硕士学位论文乙型病毒性肝炎肝硬化患者肠道黏膜屏障功能与微生态的研究21图2-2乙肝肝硬化代偿期，失代偿期组患者与健康人群属水平肠道微生态群落结构组分图Fig.2-2ThecompositiondiagramofintestinalmicroecologicalcommunitystructureatthelevelofgenusinpatientswithcompensatoryanddecompensatedhepatitisBcirrhosisandhealthypeople3.3.3样本多样性分析结果3.3.3.1分组多样性指数分析研究发现，对照组chao指数显著高于乙肝肝硬化代偿期组和乙肝肝硬化失代偿期，差异有统计学意义（P＜0.05）。因此，与健康人群相比，肝硬化失代偿期患者肠道菌群丰度明显降低，且乙肝肝硬化失代偿期组患者肠道菌群丰度低于代偿期患者。经方差分析，对照组shannon指数高于乙肝肝硬化失代偿期组，差异有统计学意义（P＜0.05）；对照组Simpson指数低于肝硬化代偿期和失代偿期，差异无统计学意义（P＞0.05）（表4）。表6乙肝肝硬化代偿期，失代偿期组患者与组健康人群肠道菌群丰度与多样性比较Tab.6ComparisonofintestinalfloraabundanceanddiversitybetweenpatientswithhepatitisBcirrhosisanddecompensatedpatients3.3.3.2稀释曲线和Shannon-Wiener曲线由上述说明已经得知，可用序列数做横轴，OTU的数目做纵轴，形成生物群落稀释曲线图（图3）。同样，利用mothur软件计算不同随机抽样下的shannon值构建Shannon-Wiener曲线（图4），每条曲线代表一个样本。由图中可以看出，随着测序条数的增加，稀释曲线和Shannon-Wiener曲线均趋于平坦，说明测序结果可反映样本菌群多样性，可进行进一步分析。组别健康对照组乙肝肝硬化代偿期组乙肝肝硬化失代偿期组PChao1253.47±114.631021.52±113.47912.43±67.84＜0.05Shannon3.73±0.643.45±0.043.29±
【参考文献】：
期刊论文
[1]3种评分系统对肝硬化胃底食管静脉曲张出血患者预后的预测价值[J]. 余维微,蔡宗宗,曾耀明,叶影,朱小区. 重庆医学. 2020(10)
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[3]肠道微生态与生命早期健康[J]. 黄毅溦,蔡美琴. 中国微生态学杂志. 2019(02)
[4]益生菌治疗胆汁淤积性肝病的效果及对肠道菌群、血氨、总胆汁酸、TGF-β1和TNF-α水平的影响[J]. 严海燕,李小芹,周方. 医药论坛杂志. 2018(12)
[5]健康幼儿大便悬液灌肠治疗肠道菌群失调1例[J]. 田威. 世界最新医学信息文摘. 2018(93)
[6]慢性乙型肝炎、肝硬化和肝衰竭患者肠道菌群变化研究[J]. 郑婷婷,蒋珊珊,方钟燎,陈茂伟. 实用肝脏病杂志. 2018(06)
[7]乙肝肝硬化与乙肝肝硬化合并糖尿病患者肠道菌群结构初步探讨[J]. 龙克娇,刘保文,卢敏,冯瑞亚,韩涛,向慧玲. 世界华人消化杂志. 2018(16)
[8]肠道微生态研究方法及应用研究进展[J]. 杨波,铁宝霞,蔡小玲,曾通旭,徐倩,哈小琴. 广西医学. 2018(10)
[9]BioCliM指数对食管胃底静脉曲张出血内镜下治疗后1年和2年预后的预测价值[J]. 沈玲燕,王彩芽,周贤斌,叶丽萍,何赛琴,张玉. 中华消化杂志. 2018 (04)
[10]肠道微生态医学研究进展概述[J]. 甄建华,于河,谷晓红. 中华中医药杂志. 2017(07)
本文编号：3269635
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