ICOSL/ICOS信号介导日本血吸虫感染小鼠肝纤维化及HSCs活化的分子机制
发布时间：2021-08-13 02:55
血吸虫病的发病机制主要是虫卵引起的肝脏和肠等组织脏器产生肉芽肿病变,并形成继发性的肝纤维化。尽管目前对于血吸虫病的发病机制尚未完全阐明,但是一些研究提示了可能参与血吸虫病的效应细胞和细胞因子。已有大量研究证实,肝星状细胞（hepatic stellate cells,HSCs）是血吸虫病肝纤维化的主要效应细胞。在血吸虫病炎症过程所分泌的多种细胞因子中,TGF-β1（transforming growth factor-β1）是目前公认的最关键的促纤维化细胞因子之一。Smad蛋白是唯一的TGF-β1受体后信使分子,介导TGF-β1信号从细胞膜传入细胞核,进而促进纤维化相关基因的表达,导致细胞外基质（extracellular matrix,ECM）沉积在肝脏形成肝纤维化。最近研究报道,microRNAs通过靶向作用于一个或多个TGF-β1/Smad信号通路的mRNA,促进或抑制HSCs的活化,从而影响肝纤维化发生、发展。课题组前期研究表明,日本血吸虫感染ICOS-Tg（ICOS transgenic,ICOS-Tg）小鼠后可显著上调ICOSL/ICOS信号发挥免疫效应。共刺激信号ICOS...
【文章来源】：苏州大学江苏省 211工程院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
研究背景
参考文献
第一部分 日本血吸虫感染小鼠肝星状细胞的分离、鉴定和培养
1.材料与试剂
1.1 实验仪器
1.2 主要试剂和耗材
1.3 主要溶液配制
2.实验方法
2.1 ICOS-Tg小鼠筛选及繁育
2.2 实验动物模型的建立
2.3 HSCs的分离、鉴定和培养
3.实验结果
3.1 ICOS-Tg小鼠的筛选及繁育
3.2 日本血吸虫感染小鼠HSCs分离、鉴定和培养
4.讨论
参考文献
第二部分 共刺激信号ICOSL/ICOS对HSCs中促纤维化分子基因表达的影响
1.材料与试剂
1.1 实验仪器
1.2 主要试剂和耗材
2.实验方法
2.1 动物模型的建立
2.2 HSCs的分离
2.3 RNA的抽提
2.4 RNA逆转录成cDNA
2.5 实时荧光定量PCR反应
2.6 统计学分析
3.实验结果
3.1 小鼠原代HSCs RNA完整性鉴定
3.2 日本血吸虫感染小鼠不同病期原代HSCs中 α-SMA基因的表达
3.3 日本血吸虫感染小鼠不同病期与肝纤维化相关蛋白基因的表达
3.3.1 ICOS-Tg小鼠与FVB/NJ小鼠不同病期原代HSCs中Collagen-Ⅰ的表达
3.3.2 ICOS-Tg小鼠与FVB/NJ小鼠不同病期原代HSCs中Collagen-Ⅲ的表达
4.讨论
参考文献
第三部分 共刺激信号ICOSL/ICOS对肝纤维化形成TGF-β1/Smad信号通路相关分子基因表达水平的影响
1.材料与试剂
1.1 实验仪器
1.2 主要试剂和耗材
2.实验方法
2.1 动物模型的建立
2.2 HSCs的分离
2.3 RNA的抽提
2.4 Small RNA的抽提
2.5 Small RNA逆转录成cDNA
2.6 实时荧光定量PCR反应
2.7 统计学分析
3.实验结果
3.1 日本血吸虫感染小鼠不同病期肝纤维化相关分子TGF-β1 基因的表达
3.2 日本血吸虫感染小鼠不同病期与肝纤维化形成TGF-β1/Smad通路相关分子Smad2基因的表达
3.3 日本血吸虫感染小鼠不同病期与肝纤维化形成TGF-β1/Smad通路相关分子Smad3基因的表达
3.4 日本血吸虫感染小鼠不同病期与肝纤维化形成TGF-β1/Smad通路相关分子Smad4基因的表达
3.5 日本血吸虫感染小鼠后不同病期与肝纤维化形成TGF-β1/Smads通路相关分子Smad7基因的表达
3.6 日本血吸虫感染小鼠不同病期与肝纤维化形成TGF-β1/Smad通路相关分子miR-21基因的表达
3.7 日本血吸虫感染小鼠不同病期与肝纤维化形成TGF-β1/Smad通路相关分子miR-454基因的表达
4.讨论
参考文献
结论
英文缩写词表
肝星状细胞与肝纤维化研究进展
参考文献
硕士学习期间参与发表和待发表的论文
基金资助
致谢
本文编号：3339599
【文章来源】：苏州大学江苏省 211工程院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
研究背景
参考文献
第一部分 日本血吸虫感染小鼠肝星状细胞的分离、鉴定和培养
1.材料与试剂
1.1 实验仪器
1.2 主要试剂和耗材
1.3 主要溶液配制
2.实验方法
2.1 ICOS-Tg小鼠筛选及繁育
2.2 实验动物模型的建立
2.3 HSCs的分离、鉴定和培养
3.实验结果
3.1 ICOS-Tg小鼠的筛选及繁育
3.2 日本血吸虫感染小鼠HSCs分离、鉴定和培养
4.讨论
参考文献
第二部分 共刺激信号ICOSL/ICOS对HSCs中促纤维化分子基因表达的影响
1.材料与试剂
1.1 实验仪器
1.2 主要试剂和耗材
2.实验方法
2.1 动物模型的建立
2.2 HSCs的分离
2.3 RNA的抽提
2.4 RNA逆转录成cDNA
2.5 实时荧光定量PCR反应
2.6 统计学分析
3.实验结果
3.1 小鼠原代HSCs RNA完整性鉴定
3.2 日本血吸虫感染小鼠不同病期原代HSCs中 α-SMA基因的表达
3.3 日本血吸虫感染小鼠不同病期与肝纤维化相关蛋白基因的表达
3.3.1 ICOS-Tg小鼠与FVB/NJ小鼠不同病期原代HSCs中Collagen-Ⅰ的表达
3.3.2 ICOS-Tg小鼠与FVB/NJ小鼠不同病期原代HSCs中Collagen-Ⅲ的表达
4.讨论
参考文献
第三部分 共刺激信号ICOSL/ICOS对肝纤维化形成TGF-β1/Smad信号通路相关分子基因表达水平的影响
1.材料与试剂
1.1 实验仪器
1.2 主要试剂和耗材
2.实验方法
2.1 动物模型的建立
2.2 HSCs的分离
2.3 RNA的抽提
2.4 Small RNA的抽提
2.5 Small RNA逆转录成cDNA
2.6 实时荧光定量PCR反应
2.7 统计学分析
3.实验结果
3.1 日本血吸虫感染小鼠不同病期肝纤维化相关分子TGF-β1 基因的表达
3.2 日本血吸虫感染小鼠不同病期与肝纤维化形成TGF-β1/Smad通路相关分子Smad2基因的表达
3.3 日本血吸虫感染小鼠不同病期与肝纤维化形成TGF-β1/Smad通路相关分子Smad3基因的表达
3.4 日本血吸虫感染小鼠不同病期与肝纤维化形成TGF-β1/Smad通路相关分子Smad4基因的表达
3.5 日本血吸虫感染小鼠后不同病期与肝纤维化形成TGF-β1/Smads通路相关分子Smad7基因的表达
3.6 日本血吸虫感染小鼠不同病期与肝纤维化形成TGF-β1/Smad通路相关分子miR-21基因的表达
3.7 日本血吸虫感染小鼠不同病期与肝纤维化形成TGF-β1/Smad通路相关分子miR-454基因的表达
4.讨论
参考文献
结论
英文缩写词表
肝星状细胞与肝纤维化研究进展
参考文献
硕士学习期间参与发表和待发表的论文
基金资助
致谢
本文编号：3339599
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