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日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗的构建及其诱导BALB/c鼠免疫应答的动态研究

发布时间:2021-10-24 06:09
  目的 日本血吸虫病属我国规划防治的严重寄生虫病之一,现有血吸虫病疫苗由于各种不足均未能应用于临床,因此,开发新型疫苗是预防该病的必经之路。本研究拟扩增日本血吸虫(Schistosoma japonicum, Sj)32抗原编码基因,以两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum,Bb)为“载体”,构建日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗,并进一步观察该疫苗诱导BALB/c鼠免疫反应的动态变化,为日本血吸虫病的防治提供一种新型疫苗。方法1.从本室保存的BL21(pET28a-Sj32)重组菌中抽提质粒pET28a-Sj32,并以该质粒为模板,PCR扩增得到Sj32抗原编码基因,利用基因重组技术将此目的基因插入载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-Sj32,以电穿孔法将其转化到Bb中,获得重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗;仍采用电穿孔法将pGEX-Sj32转化至大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)BL21(DE3)中加IPTG诱导表达,采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(Western blot)技术... 

【文章来源】:重庆医科大学重庆市

【文章页数】:75 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
英汉缩略语名词对照
中文摘要
英文摘要
前言
    参考文献
第一章 日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗的构建及其表达效率的研究
    第一节 日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗的构建及鉴定
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
        参考文献
    第二节 日本血吸虫重组质粒pGEX-Sj32的构建及其在大肠埃希菌BL21中的表达
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
        参考文献
第二章 日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗诱导BALB/c小鼠免疫应答的动态研究
    第一节 日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗诱导BALB/c小鼠血清抗体和细胞因子的动态研究
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
        参考文献
    第二节 日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗诱导BALB/c小鼠脾细胞增殖的动态变化
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
        参考文献
    第三节 日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗诱导BALB/c鼠脾脏T淋巴细胞亚群的动态研究
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
        参考文献
    第四节 日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗诱导BALB/c鼠脾细胞因子的动态研究
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
        参考文献
    第五节 日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗诱导BALB/c鼠脾细胞凋亡的动态研究
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
        参考文献
全文小结
文献综述
    参考文献
致谢
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本文编号:3454735

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