IL-17调节IFN-α抗HBV作用及其机制探讨
发布时间：2021-11-03 11:10
目的:IFN-α为慢性乙型肝炎主要的抗病毒治疗药物之一,宿主或病毒的多种因素与其疗效相关。目前,尚无促炎细胞因子IL-17是否可调节IFN-α抗HBV作用进而影响IFN-α的临床疗效的相关报道。因此,本课题拟探讨IL-17对IFN-α抗HBV作用的调节及机制,以期为阐释CHB患者IFN-α疗效不佳原因提供新的实验依据。方法:1.以转染pcDNA3.1-HBV1.3质粒的HepG2（HepG2-HBV1.3）为细胞模型,用0 ng/ml、0.2 ng/ml、1 ng/ml、25 ng/ml、50 ng/ml、100ng/ml的IL-17预处理HepG2-HBV1.3细胞24h,再用1000 IU/mL IFN-α作用48h。用ELISA法检测细胞培养上清HBsAg与HBeAg水平;western blot法检测细胞内HBsAg及HBcAg的蛋白表达;qRT-PCR法检测上清HBV-DNA及细胞内HBsAg与HBcAg mRNA的表达水平,比较分析在不同浓度的IL-17作用下对IFN-α抗HBV效应的影响;2.用50 ng/mlIL-17预处理细胞6h,12h,24h,48h,再用1000...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HepG2-HBV1.3细胞在1000IU/mlIFN-α作用24、48、72h下的细胞增殖曲线(a:细胞存活率；b：细胞OD值)
重庆医科大学硕士研究生学位论文处理 48h、72h 后细胞培养液上清 HBsAg 明显下降，差异具有统计学意义（图 2a，P 值均<0.05）；IFN-α作用 48h、72h 细胞培养液上清 HBeAg OD 值分别为 0.37±0.01、0.24±0.06，对照组 48h、72h 细胞培养液上清 HBeAg OD 值分别为 0.66±0.06、0.49±0.09，两组相比，IFN-α 处理 48h、72h 后细胞培养液上清 HBeAg 明显下降，差异具有统计学意义（图 2b，P 值均<0.05）。
表达（a：HBsAg mRNA 相对表达量，b：HBsAg mRNA 相对表达量；*、**代表与对照组相比 P<0.05、P<0.01）Figure3. The expression of intracellular HBsAg and HBcAg mRNA after 1000 IU/ml IFN-αtreatment for 24, 48 and 72 hours（a. Relative expression of HBsAg mRNA, b.Relativeexpression of HBcAg mRNA, *,**compared with cell control group P<0.05,P<0.01）2.2 IL-17 作用 HepG2-HBV1.3 细胞后 HBV 抗原的表达分析2.2.1 IL-17 对 HepG2-HBV1.3 细胞增殖的影响我们用不同浓度（0、0.2 ng/ml、1 ng/ml、25 ng/ml、50 ng/ml、100ng/ml）的IL-17 处理 HepG2-HBV1.3 细胞 12h、24h、48h、72h，细胞存活率与对照组（0ng/ml）相比，差异均无统计学意义（图 4a，P 值均>0.05）；我们检测用不同浓度的 IL-17处理 HepG2-HBV1.3 细胞 12h、24h、48h、72h 后细胞 OD 值，与对照组相比，差异均无统计学意义（图 4b，P 值均>0.05）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Pegylated interferon α-2b up-regulates specific CD8+ T cells in patients with chronic hepatitis B[J]. Ji Chen,Yan Wang,Xue-Jie Wu,Jun Li,Feng-Qin Hou,Gui-Qiang Wang,Department of Infectious Diseases,Center for Liver Diseases,Peking University First Hospital,Beijing 100034,China. World Journal of Gastroenterology. 2010(48)
[2]Expression of ICAM-1, HLA-DR, and CD80 on peripheral circulating CD1αDCs induced in vivo by IFN-αin patients with chronic hepatitis B[J]. Yong-Sheng Yu, Zheng-Hao Tang, Jing-Chao Han, Min Xi, Jie Feng, Guo-Qing Zang, Department of Infectious Diseases, Sixth People’s Hospital of Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200233, China. World Journal of Gastroenterology. 2006(09)
[3]Relationship of human leukocyte antigen class II genes with the susceptibility to hepatitis B virus infection and the response to interferon in HBV-infected patients[J]. Yong-Nian Han, Jin-Long Yang, Shui-Gen Zheng, Qun Tang, Wei Zhu, Research Unit of Liver Diseases, Shanghai 8~(th) People’s Hospital, Shanghai 200235, China. World Journal of Gastroenterology. 2005(36)
[4]1.3倍乙型肝炎病毒全基因真核表达载体的构建及在HepG2细胞中的表达[J]. 唐霓,黄爱龙,张秉强,闫歌,向明确,蒲丹,郭晖. 中华肝脏病杂志. 2003(08)
本文编号：3473577
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
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【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HepG2-HBV1.3细胞在1000IU/mlIFN-α作用24、48、72h下的细胞增殖曲线(a:细胞存活率；b：细胞OD值)
重庆医科大学硕士研究生学位论文处理 48h、72h 后细胞培养液上清 HBsAg 明显下降，差异具有统计学意义（图 2a，P 值均<0.05）；IFN-α作用 48h、72h 细胞培养液上清 HBeAg OD 值分别为 0.37±0.01、0.24±0.06，对照组 48h、72h 细胞培养液上清 HBeAg OD 值分别为 0.66±0.06、0.49±0.09，两组相比，IFN-α 处理 48h、72h 后细胞培养液上清 HBeAg 明显下降，差异具有统计学意义（图 2b，P 值均<0.05）。
表达（a：HBsAg mRNA 相对表达量，b：HBsAg mRNA 相对表达量；*、**代表与对照组相比 P<0.05、P<0.01）Figure3. The expression of intracellular HBsAg and HBcAg mRNA after 1000 IU/ml IFN-αtreatment for 24, 48 and 72 hours（a. Relative expression of HBsAg mRNA, b.Relativeexpression of HBcAg mRNA, *,**compared with cell control group P<0.05,P<0.01）2.2 IL-17 作用 HepG2-HBV1.3 细胞后 HBV 抗原的表达分析2.2.1 IL-17 对 HepG2-HBV1.3 细胞增殖的影响我们用不同浓度（0、0.2 ng/ml、1 ng/ml、25 ng/ml、50 ng/ml、100ng/ml）的IL-17 处理 HepG2-HBV1.3 细胞 12h、24h、48h、72h，细胞存活率与对照组（0ng/ml）相比，差异均无统计学意义（图 4a，P 值均>0.05）；我们检测用不同浓度的 IL-17处理 HepG2-HBV1.3 细胞 12h、24h、48h、72h 后细胞 OD 值，与对照组相比，差异均无统计学意义（图 4b，P 值均>0.05）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Pegylated interferon α-2b up-regulates specific CD8+ T cells in patients with chronic hepatitis B[J]. Ji Chen,Yan Wang,Xue-Jie Wu,Jun Li,Feng-Qin Hou,Gui-Qiang Wang,Department of Infectious Diseases,Center for Liver Diseases,Peking University First Hospital,Beijing 100034,China. World Journal of Gastroenterology. 2010(48)
[2]Expression of ICAM-1, HLA-DR, and CD80 on peripheral circulating CD1αDCs induced in vivo by IFN-αin patients with chronic hepatitis B[J]. Yong-Sheng Yu, Zheng-Hao Tang, Jing-Chao Han, Min Xi, Jie Feng, Guo-Qing Zang, Department of Infectious Diseases, Sixth People’s Hospital of Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200233, China. World Journal of Gastroenterology. 2006(09)
[3]Relationship of human leukocyte antigen class II genes with the susceptibility to hepatitis B virus infection and the response to interferon in HBV-infected patients[J]. Yong-Nian Han, Jin-Long Yang, Shui-Gen Zheng, Qun Tang, Wei Zhu, Research Unit of Liver Diseases, Shanghai 8~(th) People’s Hospital, Shanghai 200235, China. World Journal of Gastroenterology. 2005(36)
[4]1.3倍乙型肝炎病毒全基因真核表达载体的构建及在HepG2细胞中的表达[J]. 唐霓,黄爱龙,张秉强,闫歌,向明确,蒲丹,郭晖. 中华肝脏病杂志. 2003(08)
本文编号：3473577
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