HBV上调miR-181a/362/382/19a对PTEN/HSPA5/HSPA2表达和肝癌细胞生物学行为影响的研究

发布时间：2021-11-22 00:31

　　【背景与目的】流行病学研究表明慢性HBV感染是肝细胞癌的重要病因。中国是肝炎大国,探索HBV感染影响肝癌发生发展的机制对预防和治疗HBV感染相关的肝癌具有重要意义。近年来研究报道miRNA的异常表达与肿瘤关系密切。课题组前期发现HBV可引起miR-181a/362/382/19a在肝癌细胞和组织中表达上调,HSPA5和HSPA2可能是其潜在靶基因。HSPA5是位于内质网的一种重要分子伴侣,在应激状态下表达升高以维持内质网稳定和保护细胞免受凋亡。HSPA2也属于HSP70家族,与HSP70的氨基酸有84%的同源性,但目前研究较少。前期研究发现HSPA5/HSPA2在肝癌中的表达明显高于癌旁组织,但在体外稳定表达HBV的Hep G2.215细胞系中其表达低于Hep G2细胞系。因此HBV上调miR-181a/362/382/19a影响肝癌发生发展的机制以及HSPA5/HSPA2在体内肝癌组织与体外细胞模型表达差异的原因和意义均有待进一步探索。我们推测HBV感染可能影响多种miRNA的表达,这些miRNA调控多个靶基因的表达,进而影响多条信号通路,共同影响肝癌的发生发展。进一步筛选出miR-... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：90 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

miR-382-5p/19a-3p靶向HSPA2的荧光素酶报告基因分析

科 技 大 学 博 士 学 位 论 文织标本中 PTEN 的表达化学的方法检测临床肝癌组织标本中 PTEN 的蛋否将肝癌组织（Ca）和癌旁组织（CaP）分为 HB、HBV 未感染的肝癌组织[HBV(-)Ca]组、HBV 和 HBV 未感染的癌旁组织[HBV(-)CaP]组，比较异。从图 5 结果可见在 HBV(+)Ca 组中 PTEN 的(+)CaP 组中 PTEN 的表达明显低于 HBV(-)CaP 组织以及癌旁组织中 PTEN 的表达明显降低，在 HBV 感染的肝细胞癌变中起重要作用。

华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文(WT)和突变型(MUT)。将上述质粒分别与miR-181a/362的mimic共转染HepG2细胞，培养24h后检测细胞萤火虫荧光素酶强度和海肾荧光素酶强度，计算相对荧光强度并分析其差异。从图6B中可见，miR-181a的mimic和GV272-PTE(miR-181a) 野生型(WT)质粒共转染HepG2细胞的相对荧光强度明显低于其和GV272-PTEN (miR-181a) 突 变 型 (MUT) 质 粒 共 转 染 ， miR-362 的 mimic 与GV272-PTEN (miR-362-3p) 野 生 型 (WT) 质 粒 共 转 时 也 显 著 低 于 其 和GV272-PTEN (miR-362-3p) 突 变 型 (MUT) 质 粒 共 转 。 以 上 实 验 结 果 说 明miR-181a/362-3p可分别直接靶向结合PTEN的3’UTR，PTEN是miR-181a/362的靶基因。


本文编号：3510566