弓形虫感染导致DC2.4细胞外泌体特征差异的研究

发布时间：2021-11-22 08:48

　　目的分析小鼠树突状细胞（DC2.4）感染弓形虫后所分泌的外泌体及其富集的小RNA与piRNA的变化,为外泌体在弓形虫-宿主互作中的作用提供必要的信息。方法 DC2.4细胞分为2组（未感染组与感染组）,用含无外泌体血清的培养基培养。待细胞长满,感染组用弓形虫RH株速殖子感染28 h,未感染组则培养28 h。收集两组细胞的培养上请,采用超速离心法分别提取外泌体,通过透射电镜检测外泌体形态,并用纳米颗粒追踪仪检测外泌体的粒径大小以及颗粒密度。对外泌体进行小RNA高通量测序分析,用生物信息学方法分析感染组与对照组差异显著的piRNA,对并其靶基因及功能进行预测。结果对弓形虫感染与未感染的DC2.4细胞分泌的外泌体进行形态学鉴定以及粒径大小和密度的比较,发现弓形虫感染会导致DC2.4分泌的外泌体密度增加;而通过外泌体小RNA测序,发现弓形虫感染会导致外泌体中miRNA及piRNA数目增加,其中感染后显著升高的piRNA包括piR-mmu-159、piR-mmu-1526、piR-mmu-9082、piR-mmu-17405、和piR-mmu-25576。对上述piRNA靶基因的预测和KEGG分析... 

【文章来源】：南方医科大学学报. 2020,40(05)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

外泌体形态学鉴定图

宿主细胞感染弓形虫28 h后，弓形虫在宿主细胞内大量增殖，并且大量的弓形虫物质分泌到宿主细胞内，参与宿主细胞的调控，因而此阶段对弓形虫感染致病过程十分重要[23]。我们用弓形虫感染DC2.4细胞28 h后，对感染与未感染弓形虫的DC2.4细胞进行外泌体提取，通过透射电镜的形态学鉴定，我们发现DC2.4细胞分泌的外泌体的形态与弓形虫感染无太大关联。而经过纳米颗粒追踪鉴定，我们发现由于弓形虫的感染，会导致DC2.4细胞分泌的外泌体在同样提取的条件下密度升高。在对外泌体的小RNA进行高通量测序后，我们发现感染组的外泌体富集的小RNA数比未感染组高，这表明弓形虫感染可能通过外泌体途径将自身的一些小RNA分泌出细胞，或者是由于弓形虫的感染导致DC2.4细胞外泌体富集的小RNA组发生变化的结果。图3 KDA分析结果图

KDA分析结果图


本文编号：3511349