乙型肝炎病毒介导肝星状细胞和单核细胞相互作用及其机制的研究

发布时间：2021-12-18 03:49

　　研究背景和目的:乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）感染是导致慢性肝炎、肝纤维化、肝硬化以及肝细胞癌的主要因素,而肝星状细胞（Hepatic stellate cell,HSC）是启动这些肝脏疾病的是主要效应细胞之一。但是,关于HBV对肝星状细胞的直接调节作用的研究相对较少。因此,为了更好的了解HBV感染后导致的肝脏疾病发生以及免疫耐受形成的原因,探究HBV对肝星状细胞的影响是十分必要的。此外,单核/巨噬细胞作为肝脏内一类主要的固有免疫细胞,在抵御疾病和调节肝脏免疫方面具有重要作用。但是HBV作用下的肝星状细胞与单核/巨噬细胞之间发生的相互作用机制需要进一步研究。因此,探究HBV作用于肝星状细胞后对单核细胞的影响,对HBV感染后导致的免疫抑制以及肝脏纤维化的发生具有重要意义。方法:为了探究HBV对肝星状细胞的影响,我们在培养肝星状细胞时加入具有感染活力的HBVcc,通过免疫荧光技术来检测肝星状细胞中HBV感染情况。在HBVcc和HBs Ag作用下,通过q PCR技术检测肝星状细胞纤维化分子及细胞因子的基因表达水平。HBV与肝星状细胞培养产生的条件培养基作用于单核细... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

HBV病毒结构的介绍[4]

第1章绪论3维化因子。此外，HSC活化后细胞的吞噬能力、内质网应激、氧化应激、视黄醇和胆固醇代谢以及表观遗传学等都发生复杂的变化[16]。HSC的激活是肝纤维化形成过程的关键事件，同时HSC在肝损伤和修复过程中的作用是了解肝纤维化的一个重要特征[17,18]。肝脏纤维化扰乱了肝脏的正常结构和功能，尤其是在肝硬化的末期，因此，肝纤维化也被认为是一种癌前状态，它为原发性肿瘤的发展提供了适合的微环境。图1.2肝内细胞调节HSC的示意图[15]HSC活化除了诱导ECM表达引起肝纤维化之外，越来越多的研究发现活化的HSC表达各种细胞因子及受体，包括PDGF、TGF-β、MCP1、RANTES、IL-8、MIP-2、CXCL12等[19-21]。这些细胞因子是HSC与肝内细胞之间的交流的重要介质。因此，研究HSC产生的细胞因子的生物学功能可以更加清楚的了解HSC对肝内细胞之间的作用，同时为更好的治疗肝脏疾病提供理论背景。1.2.2HBV对肝星状细胞的影响慢性HBV感染是导致肝纤维化的主要原因，最终发展为肝硬化和肝细胞癌，这可能是因为HBV或病毒蛋白与HSC直接或间接相互作用导致的。虽然有几篇文献研究报道了HBV可直接激活HSC，但是实验结果不明显，存在很多疑问，对于具体的作用机制更是没有提及。目前大多研究表明，HBV主要通过间接作用的方式借助肝内其他细胞调节HSC的功能。最近发现HBx蛋白可能与HBV相关的纤维化进展有关。HBx是一种多功能调节剂，通过与宿主细胞直接或间接作用，调节基因转录、细胞周期进展、蛋白降解途径、细胞凋亡等细胞活动。此外，HBx通过与细胞之间的相互作用参与多种胞质信号通路，包括PKC、MAPK以及JNK等信号通路的活化[22]。此外，HBx也可通过间接的方式调节HSC的功

第1章绪论6进一步的体外实验表明[45]，HBsAg和HBV通过TLR2/MyD88/NF-κB信号通路诱导单核细胞PD-L1、HLA-E及免疫调节因子表达[46]。由此推测，HBV诱导的抑制性单核/巨噬细胞对HBV的持续感染以及肝脏纤维化的发生可能具有重要作用。此外，急性HBV感染患者体内HBsAg水平和MDSC数量均低于慢性HBV感染者，同时MDSC的比例与HBsAg的含量具有正相关的趋势，体外实验证实HBsAg可诱导单核细胞分化为MDSC，这是导致肝脏免疫抑制的一个重要原因[47,48]。1.4肝星状细胞与单核/巨噬细胞1.4.1肝星状细胞对单核/巨噬细胞的调节作用大量的研究探索了HSC在肝纤维化和肝脏修复中的重要性。HSC除了在肝纤维化中的作用外，HSC与肝内细胞之间的相互作用对肝脏的免疫调节具有重要作用，尤其是HSC与免疫细胞之间的双向调节是维持正常肝功能和抵御疾病所必需的基础[49]。图1.3HSC的免疫调节作用示意图[50]研究表明HSC表达多种受体和可溶性效应分子，这使它们能够与不同的免疫细胞亚群相互作用。肝损伤时，HSC通过表达细胞因子（MCP-1、CCL21、RANTES和MIP-2等）诱导单核细胞向肝脏浸润[51]。活化的HSCs诱导外周单核细胞以及肝内单核细胞分化成为可分泌IL-10和TGF-β的具有免疫调节作用的巨噬细胞[52,53]。HSC促进骨髓来源的免疫抑制性细胞（MDSC）的积累，尤其是Mo-MDSC[54]。HSC通过COX2-PGE2-EP4信号传导促进MDSC分化，使用COX-2抑制剂降低PEG2的产生可显著减少MDSC的积累，而且活化的HSC诱

【参考文献】：
期刊论文
[1]Immune suppression in chronic hepatitis B infection associated liver disease: A review[J]. Tian-Yang Li,Yang Yang,Guo Zhou,Zheng-Kun Tu.  World Journal of Gastroenterology. 2019(27)
[2]Chronic hepatitis B and metabolic risk factors:A call for rigorous longitudinal studies[J]. Wai-Kay Seto.  World Journal of Gastroenterology. 2019(03)
[3]Hepatic immune tolerance induced by hepatic stellate cells[J]. Ching-Chuan Hsieh,Chien-Hui Hung,Lina Lu,Shiguang Qian.  World Journal of Gastroenterology. 2015(42)
[4]Hepatitis B virus X protein promotes proliferation and upregulates TGF-β1 and CTGF in human hepatic stellate cell line,LX-2[J]. Guang-Hui Guo,De-Ming Tan,Ping-An Zhu and Fei Liu Department of Infectious Diseases,Xiangya Hospital,Central South University,Changsha 410008,China.  Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2009(01)



本文编号：3541571