HIV-1感染诱导丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Citron kinase上调机制研究

发布时间：2021-12-25 05:19

　　HIV-1感染可以改变宿主细胞的表达谱,上调和病毒转录复制翻译包装所需的宿主蛋白,使宿主变成更加适应病毒复制繁殖的环境。研究表明丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Citron kinase（citK）可以促进HIV-1病毒的包装释放,所以我们在本文中进一步探讨了HIV-1感染对Citron kinase在自然生理状态下的表达是否有调节作用。我们用含有荧光素酶报告基因的HIV-1假病毒感染外周血单个核细胞（PBMC）和HEK293T细胞系,检测Citron kinase表达的上调情况。此外,将Citron kinase的上游启动子克隆入含荧光素酶报告基因的载体上,检测HIV假病毒感染对Citron kinase启动子的影响。结果显示:HIV-1可以显著提高PBMC细胞中Citron kinase的表达量,而Citron kinase为HIV-1复制包装所需。在原代CD4+T细胞中过表达Citron kinase,HIV-1的复制可以提高2倍以上。沉默Citron kinase的表达,HIV-1病毒产生量显著降低。在HEK293T细胞系中,HIV-1假病毒感染可以使Citron kinase的mRNA... 

【文章来源】：病毒学报. 2015,31(04)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
材料与方法
    1材料与试剂
    2细胞的分离与培养
    3含有启动子的荧光素酶报告载体的构建
    4细胞转染
    5Western-blot转染
    6荧光素酶活性测定
    7荧光定量RT-PCR
结果
    1 HIV-1感染PBMC引起Citron kinase表达显著上调
    2 Citron kinase是HIV-1在原代CD4+T细胞中复制所需的重要蛋白
    3 HIV-1感染HEK293T引起Citron kinase表达上调
    4 pGL3-citKP荧光素酶报告基因载体的构建和测试
讨论



本文编号：3551858