隐匿性乙型肝炎病毒感染及其S区基因突变的分析
发布时间：2022-01-10 12:05
目的:本研究分析临床上血清HBsAg阴性、HBV DNA阳性的HBV隐匿性感染的血清学标志物表达模式,评价CIA法的检测性能。通过对OBI标本HBV S区基因特别是“α”决定簇内核苷酸的测序,分析HBV S区基因突变导致的氨基酸替换现象。进一步分析本地区HBV S区基因高频突变位点,及流行病学数据,探讨造成OBI的原因及其病理生理学机制。方法:本研究分为两个部分。第一部分:收集临床上HBcAb阳性、HBsAg阴性的五组血清学模式血清样本1527例,通过ELISA复筛HBcAb从中选择OD450nm值<0.070的样本,采用高敏PCR检测试剂盒检测HBV DNA。第二部分:收集第一部分研究中经HBV DNA检测阳性的OBI组样本和HBV DNA高载量的慢乙肝病人对照组样本。使用两轮PCR扩增技术扩增筛选出的OBI临床样本HBV S区基因全长,通过对PCR产物直接测序或克隆测序对HBV S区基因进行核苷酸序列分析,将得到的S区基因序列与相应基因亚型的参考序列进行比对分析,获得各样本HBV S区基因突变及氨基酸变异的情况。统计学分析:采用SPSS19.0统计软件进行数据处理与统计学分析...
【文章来源】：蚌埠医学院安徽省
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
巢式PCR引物P1、P2和P3的选择28
图 3、引物 P3、P4 和 P5 对 HBV S 区 PCR 扩增结果 为 DL2000 分子量标记物；1~2 号泳道为样本 S2 使用引物 P3，退火温度 55℃和电泳结果；B.1~4 号泳道为样本 S2 使用引物 P4 退火温度 55℃和 58℃，引℃和 58℃ PCR 产物电泳结果。述三对引物（P2、P3、P5）经验证都可成功扩增出 HBV S 区基CR 技术进行三轮扩增，第一轮扩增引物为 P3（F3-16 R3-1090），为 P2（F2-101 R2-861），第三轮扩增引物为 P5（F5-146 R5-861）30
图 2、引物 P2 PCR 扩增产物（800bp 左右）测序结果经 BLAST 比对结果图 3、引物 P3、P4 和 P5 对 HBV S 区 PCR 扩增结果.M 为 DL2000 分子量标记物；1~2 号泳道为样本 S2 使用引物 P3，退火温度 55℃和 58℃的
【参考文献】：
期刊论文
[1]HBsAg阴性献血者隐匿性HBV感染的血清学特征及其与病毒载量的关系[J]. 周怡,史恩溢,曹谊,王凯,蒋靓,王玲玲,陆荣. 临床输血与检验. 2017(06)
[2]华东地区献血者人群隐匿性乙型肝炎病毒感染及S区变异分析[J]. 蒋菲菲,吕蓉,李敏,赵阳,林洪铿,钱榕. 中国输血杂志. 2017(07)
[3]ELISA和CMIA检测HBcAb阳性血清HBsAg结果分析[J]. 何成禄,李欢,李娅,马丽菊,钟敏,李梦瑶,李庆. 检验医学. 2017(08)
[4]HBsAb阳性隐匿性乙型肝炎病毒感染者HBV PreS-S区基因突变研究[J]. 郭燕,蔡斌,段勇,景媛媛,白珉,现红斌,巩晗实. 现代检验医学杂志. 2017(04)
[5]乙型肝炎病毒表面抗原试剂检测表面抗原变异株[J]. 蓝海云,戴峻英,姚昕,周诚. 中国病毒病杂志. 2016(06)
[6]Genetic variation of occult hepatitis B virus infection[J]. Hui-Lan Zhu,Xu Li,Jun Li,Zhen-Hua Zhang. World Journal of Gastroenterology. 2016(13)
[7]Occult infection related hepatitis B surface antigen variants showing lowered secretion capacity[J]. Hong Kim,Seoung-Ae Lee,You-Sub Won,Hyun Joo Lee,Bum-Joon Kim. World Journal of Gastroenterology. 2015(06)
[8]Clinical implications of hepatitis B virus mutations:Recent advances[J]. Ivana Lazarevic. World Journal of Gastroenterology. 2014(24)
[9]Yeast expression and DNA immunization of hepatitis B virus S gene with second-loop deletion of α determinant region[J]. Hui Hu Xiao-Mou Peng Yang-Su Huang Lin Gu Qi-Feng Xie Zhi-Liang Gao Department of Infectious Diseases,the Third Affiliated Hospital,Sun Yat-Sen University,Guangzhou 510630,Guangdong Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2004(20)
本文编号：3580678
【文章来源】：蚌埠医学院安徽省
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
巢式PCR引物P1、P2和P3的选择28
图 3、引物 P3、P4 和 P5 对 HBV S 区 PCR 扩增结果 为 DL2000 分子量标记物；1~2 号泳道为样本 S2 使用引物 P3，退火温度 55℃和电泳结果；B.1~4 号泳道为样本 S2 使用引物 P4 退火温度 55℃和 58℃，引℃和 58℃ PCR 产物电泳结果。述三对引物（P2、P3、P5）经验证都可成功扩增出 HBV S 区基CR 技术进行三轮扩增，第一轮扩增引物为 P3（F3-16 R3-1090），为 P2（F2-101 R2-861），第三轮扩增引物为 P5（F5-146 R5-861）30
图 2、引物 P2 PCR 扩增产物（800bp 左右）测序结果经 BLAST 比对结果图 3、引物 P3、P4 和 P5 对 HBV S 区 PCR 扩增结果.M 为 DL2000 分子量标记物；1~2 号泳道为样本 S2 使用引物 P3，退火温度 55℃和 58℃的
【参考文献】：
期刊论文
[1]HBsAg阴性献血者隐匿性HBV感染的血清学特征及其与病毒载量的关系[J]. 周怡,史恩溢,曹谊,王凯,蒋靓,王玲玲,陆荣. 临床输血与检验. 2017(06)
[2]华东地区献血者人群隐匿性乙型肝炎病毒感染及S区变异分析[J]. 蒋菲菲,吕蓉,李敏,赵阳,林洪铿,钱榕. 中国输血杂志. 2017(07)
[3]ELISA和CMIA检测HBcAb阳性血清HBsAg结果分析[J]. 何成禄,李欢,李娅,马丽菊,钟敏,李梦瑶,李庆. 检验医学. 2017(08)
[4]HBsAb阳性隐匿性乙型肝炎病毒感染者HBV PreS-S区基因突变研究[J]. 郭燕,蔡斌,段勇,景媛媛,白珉,现红斌,巩晗实. 现代检验医学杂志. 2017(04)
[5]乙型肝炎病毒表面抗原试剂检测表面抗原变异株[J]. 蓝海云,戴峻英,姚昕,周诚. 中国病毒病杂志. 2016(06)
[6]Genetic variation of occult hepatitis B virus infection[J]. Hui-Lan Zhu,Xu Li,Jun Li,Zhen-Hua Zhang. World Journal of Gastroenterology. 2016(13)
[7]Occult infection related hepatitis B surface antigen variants showing lowered secretion capacity[J]. Hong Kim,Seoung-Ae Lee,You-Sub Won,Hyun Joo Lee,Bum-Joon Kim. World Journal of Gastroenterology. 2015(06)
[8]Clinical implications of hepatitis B virus mutations:Recent advances[J]. Ivana Lazarevic. World Journal of Gastroenterology. 2014(24)
[9]Yeast expression and DNA immunization of hepatitis B virus S gene with second-loop deletion of α determinant region[J]. Hui Hu Xiao-Mou Peng Yang-Su Huang Lin Gu Qi-Feng Xie Zhi-Liang Gao Department of Infectious Diseases,the Third Affiliated Hospital,Sun Yat-Sen University,Guangzhou 510630,Guangdong Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2004(20)
本文编号：3580678
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