寨卡病毒RNA恒温快速扩增检测方法的建立

发布时间：2022-07-22 17:14

　　2015年以来,寨卡病毒（Zika virus,ZIKV）感染被报告和小头症之间存有关联,已有多个国家和地区报告ZIKV感染证据,我国持续面对ZIKV输入风险。为发展适用于现场的快速高效的ZIKV核酸检测方法,选取ZIKV NS1片段保守区设计特异性引物探针,经优化建立了多种功能蛋白介导的ZIKV RNA恒温快速扩增检测方法。利用所制备的ZIKV NS1片段体外转录RNA作为参考品,并与实时荧光定量RT-PCR检测结果进行比较。同时利用ZIKV细胞培养物中加入健康人血清制备的模拟临床标本进行初步验证。结果显示,建立的RNA恒温快速扩增检测方法可100%检出100拷贝/μL体外转录RNA,可在15 min以内判读,大大低于PCR的常规检测时间;用该方法检测其他相关病毒,无交叉反应。病毒滴度在（10~4～10~7PFU/mL）之间的模拟临床病人标本可达到100%检出。本研究建立的ZIKV RNA恒温扩增快速检测方法快速、灵敏、特异,适用于ZIKV现场应急检测,为ZIKV的防控提供了重要的技术支撑。 

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【文章目录】：
材料与方法
    1 实验模板及样本
    2 主要实验试剂及仪器
        2.1 试剂
        2.2 仪器
    3 引物探针设计
    4 实时荧光RNA恒温快速扩增
    5 灵敏性评价
    6 特异性评价
    7 模拟临床标本验证
结果
    1引物探针筛选结果
    2灵敏性评价
    3特异性评价
    4模拟临床标本验证
讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]寨卡病毒检测方法的研究进展[J]. 李浪,李华文,顾大勇,何建安.  医学研究生学报. 2018(05)
[2]病毒性出血热概述[J]. 黄晓霞,李德新.  中国国境卫生检疫杂志. 2018(02)
[3]深圳口岸输入寨卡病毒的基因和生物学特性分析[J]. 王强,杨扬,郑海霞,毕玉海,宋敬东,李力强,顾大勇,王培毅,李世华,刘升,赵迎泽,刘磊,高福,刘映霞.  科学通报. 2016(22)
[4]寨卡病毒疫情及研究进展[J]. 程锦泉,王兴鲍,魏雅臻,洪烈城,鲍雪琴,符霞.  中国公共卫生. 2016(05)
[5]寨卡病毒研究现况及疫情形势[J]. 郑阳,王全意.  国际病毒学杂志. 2016 (02)



本文编号：3665014