泡球蚴囊液对肝细胞生存能力的影响及初步机制探索

发布时间：2023-02-08 21:40

　　目的:1.通过测定肝泡型包虫病(HAE)患者肝脏组织中凋亡、自噬相关标记物及DDIT4的表达情况;初步探索凋亡、自噬及DDIT4在泡型包虫病中的作用及三者间的相互作用机制。2.通过体外实验探索泡球蚴源性囊液对肝细胞生存能力的影响,在细胞水平验证泡球蚴囊液是否可诱导凋亡的发生。方法:1.采用免疫组化染色、q-PCR及Western blot检测15例患者病灶边缘带肝组织及同患者正常肝组织中caspase3,Bax,Bcl-2,LC3-I,LC3-II,Beclin-1,m TOR及DDIT4的表达,并分析DDIT4与凋亡、自噬相关标记物的相关性;2.用泡球蚴源性囊液干预体外培养的小鼠肝细胞AML-12,检测细胞增殖能力及细胞活力变化,并结合流式细胞仪凋亡检测试验判断泡球蚴源性囊液对肝细胞的影响。结果:1.组织免疫组化、q-PCR及Western blot实验结果表明:caspase3,Bax,LC3-I,LC3-II,Beclin-1及DDIT4的m RNA及各蛋白在HAE边缘带肝组织及正常肝组织均有不同程度表达,且上述指标在HAE边缘带肝组织的表达高于正常肝组织;而Bcl-2及m TO...

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
中英文对照表
第一章 引言
第二章 凋亡、自噬相关标记物及DDIT4在临床患者中的表达
    2.1 资料与方法
        2.1.1 研究对象
        2.1.2 实验材料
        2.1.3 实验步骤及方法
        2.1.4 统计分析
    2.2 结果
        2.2.1 免疫组化检测凋亡、自噬及DDIT4等蛋白在边缘带及正常肝组织表达结果
        2.2.2 q-PCR检测凋亡、自噬及DDIT4 等蛋白在边缘带及正常肝组织表达结果
        2.2.3 Western blot检测凋亡、自噬及DDIT4 等蛋白在边缘带及正常肝组织表达结果
        2.2.4 DDIT4与凋亡、自噬相关标记物相关性分析
    2.3 讨论
第三章 泡球蚴囊液对小鼠肝细胞生存能力的影响
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验动物及细胞
        3.1.2 主要试剂及仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 构建泡球蚴小鼠模型及泡球蚴囊液提取
        3.2.2 细胞培养及原头节培养上清干预小鼠肝细胞
        3.2.3 原头节培养上清对小鼠AML-12肝细胞增殖能力及细胞活力影响的检测
        3.2.4 流式细胞仪测凋亡
    3.3 统计分析
    3.4 实验结果
        3.4.1 原头节培养上清对小鼠 AML-12 肝细胞增殖的影响
        3.4.2 原头节培养上清对小鼠 AML-12 肝细胞活力的影响
        3.4.3 原头节培养上清干预小鼠AML-12肝细胞后凋亡检测结果
    3.5 讨论
第四章 全文结论
附图
参考文献
致谢
附录A 综述 自噬的研究进展及在肝脏等疾病中的作用
    参考文献
作者简介



本文编号：3738421