梅毒螺旋体诱导巨噬细胞外泌体中miR-146a-5p降低血管内皮细胞通透性及炎细胞跨内皮迁移

发布时间：2023-04-29 00:28

　　目的:鉴定来源于梅毒螺旋体(Treponema pallidum subsp.Pallidum,Tp)刺激后的巨噬细胞分泌外泌体中miRNA表达谱。探讨目标miR-146a-5p对血管内皮细胞通透性及单个核细胞跨内皮迁移的作用及其相关机制。方法:将Tp接种于雄兔睾丸,建立感染模型,获取足量、高纯度梅毒螺旋体。ExoQuick-TCTM试剂盒提取Tp刺激巨噬细胞分泌的外泌体,予以透射电镜、NTA及Western blot鉴定。提取Tp刺激组和对照细胞外泌体中的miRNA进行芯片鉴定,筛选差异性miRNA。选择差异性表达较明显的miR-146a-5p作为研究对象,RT-qPCR进一步验证miR-146a-5p的表达情况。提取20个早期梅毒患者和20名健康对照血浆外泌体,RT-qPCR验证miR-146a-5p的表达情况。外泌体与HUVEC共培养后通过激光共聚焦显微镜和RT-qPCR的方法验证miR-146a-5p在细胞间传递。应用Transwell构建HUVEC单层模型,检测外泌体中miR-146a-5p对HUVEC单层的通透性及单个核细胞跨内皮迁移的影响。应用双荧光素酶报告基因检测法对m...

【文章页数】：86 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
主要中英文缩写
中文摘要
ABSTRACT
前言
    参考文献
第一部分 梅毒螺旋体诱导巨噬细胞分泌外泌体中差异性miRNA筛选与验证
    引言
    材料和方法
    结果
    讨论
    参考文献
第二部分 外泌体中miR-146a-5p降低血管内皮细胞的单个核细胞跨内皮迁移和通透性
    引言
    材料与方法
    结果
    讨论
    参考文献
第三部分 外泌体中miR-146a-5p靶向调控JAM-C基因作用
    引言
    材料与方法
    结果
    讨论
    参考文献
全文总结
文献综述
    参考文献
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致谢



本文编号：3804792