干血斑和血清样本用于检测乙型肝炎病毒DNA及耐药突变的比较
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【摘要】:目的验证干血斑(DBS)样本替代静脉血血清样本用于检测乙型肝炎病毒(HBV)基因诊断的可行性。方法选择慢性乙型肝炎患者100例,血清HBV的病毒载量1×102拷贝/m L,抽取静脉血同时制备DBS样本和血清样本,进行HBV DNA定量检测,比较DBS与血清样本检测结果的相关性。选取73例基因型主要为B、C型的患者,进行DBS和血清样本基因型检测的比较。同时随机选取56例乙型肝炎患者的DBS和血清样本,采用实验室自建的套式聚合酶链反应(PCR)扩增HBV的逆转录酶(RT)区段,通过geno2pheno数据库进行结果分析,比较二者耐药性的检测结果。结果 DBS样本HBV DNA的检测范围为2~8 log10拷贝/m L,与血清样本HBV DNA的检测结果高度相关(r2=0.82,P0.05),DBS样本HBV DNA定量值比血清样本低1个数量级。2种样本HBV耐药性检测结果的总符合率为95.83%;DBS和血清样本耐药状态的检出率分别为82.14%和85.71%(P0.05)。2种样本HBV基因分型结果的符合率为100.00%。结论 DBS样本可用于HBV DNA的定量及耐药性的检测。
【作者单位】: 上海市公共卫生临床中心医学检验科;上海市公共卫生临床中心应急检测和生物安全部;
【关键词】: 干血斑 乙型肝炎病毒 DNA 耐药性
【基金】:上海市科学技术委员会西医引导类项目(124119a1200) 上海市卫生和计划生育委员会科研课题青年项目(20144Y0075)
【分类号】:R512.62;R440
【正文快照】: HBV DNA检测。采用ABI 7500和Gene Amp PCRsystem 9700(美国Applied Biosystem公司)进行荧光定量聚合酶链反应(polymerase chainreaction,PCR)。三、方法1.DBS和血清样本的HBV DNA检测和相关性分析(1)DBS样本的制备:50μL全血制作1个单位DBS样本,室温自然干燥,4℃保存,检测时
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