基于多重PCR的副溶血弧菌大流行菌群及其毒力基因检测方法的建立与评价

发布时间：2017-06-30 04:05

  本文关键词：基于多重PCR的副溶血弧菌大流行菌群及其毒力基因检测方法的建立与评价，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的基于多重聚合酶链反应(PCR)建立一种快速方便的检测副溶血弧菌"大流行菌群"及其毒力基因的方法。方法结合副溶血弧菌"大流行菌群"的群特异鉴定方法 GS-PCR,与副溶血弧菌致病相关的耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热直接溶血素相关溶血素基因(trh)序列设计引物,建立并优化多重PCR检测方法。用已知的大流行菌株和非大流行临床分离株,对其进行特异性、灵敏度等性能的评价。并对224株食品分离株和3株临床分离株副溶血弧菌进行了再鉴定。结果副溶血弧菌"大流行菌群"有群特异PCR标识基因和tdh扩增条带。而其他细菌扩增结果呈阴性。检测灵敏度可达到105CFU/ml。对实验室保存的224株食品分离株和3株临床分离株进行再鉴定表明,其中5株为副溶血弧菌"大流行菌群",其中3株为tdh阳性、trh阴性,2株tdh、trh均阴性。结论本研究所建立的多重PCR方法特异性好、灵敏度高。为副溶血弧菌"大流行菌群"及其毒力基因的快速大规模检测提供良好的技术支持。
【作者单位】： 河北省疾病预防控制中心;
【关键词】： 副溶血弧菌 大流行菌群 耐热直接溶血素 耐热直接溶血素相关溶血素 群特异PCR 多重PCR
【基金】：2013年度河北省省级重大医学科研课题(No.zd2013067)~~
【分类号】：R516.3;R440
【正文快照】： 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)是一种嗜盐的革兰阴性菌,广泛分布于水生环境及无脊椎动物中,也是常见的食源性致病菌。与引起人类胃肠炎的临床分离株相比,环境分离株普遍缺乏耐热直接溶血素(thermostable direct hemolysin,TDH)、TDH相关溶血素(TDH-related hemolysi

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本文编号：500475