巨噬细胞过表达miR-125b促进其凋亡

发布时间：2017-08-26 05:08

  本文关键词：巨噬细胞过表达miR-125b促进其凋亡

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【摘要】：目的探讨肺结核患儿外周血单个核细胞(PBMC)中miR-125b和靶基因Raf1原癌基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(RAF1)表达;观察miR-125b对巨噬细胞凋亡和细胞活力的调节。方法收集和分离肺结核患儿和健康儿童的PBMC,采用荧光定量PCR检测miR-125b和RAF1的mRNA表达水平,Western blot法检测RAF1的蛋白水平。THP-1巨噬细胞分别转染miR-125b模拟物(miR-125b mimic)、阴性对照模拟物(NC-mimic)、miR-125b抑制物(miR-125b inhibitor)以及阴性对照抑制物(NC-inhibitor),共培养48 h;利用Western blot法检测THP-1巨噬细胞中RAF1表达,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡,CCK-8法检测细胞活力。结果在结核患儿PBMC的miR-125b表达下调,RAF1的mRNA和蛋白水平都升高。在THP-1巨噬细胞中过表达miR-125b时,RAF1表达下调,促进巨噬细胞凋亡,降低细胞活力;在THP-1巨噬细胞中miR-125b表达被抑制时,RAF1表达升高,抑制巨噬细胞凋亡,提高细胞活力。结论结核患儿PBMC中miR-125b水平降低,上调THP-1巨噬细胞miR-125b水平促进巨噬细胞凋亡并抑制细胞活力。
【作者单位】： 重庆医科大学附属儿童医院消化科;重庆医科大学附属儿童医院感染科;重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿科学重庆市重点实验室;
【关键词】： miR-b Raf原癌基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(RAF) THP-巨噬细胞 细胞凋亡
【基金】：国家自然科学基金(81071406) 重庆市医学科研项目计划(20142046)
【分类号】：R521
【正文快照】： 结核病(tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染人体所引起的慢性传染性疾病,为可致人死亡的严重疾病之一,威胁着儿童的健康。2015年世界卫生组织全球结核病报告[1]显示,在2014年有新发和复发结核病儿童共计约35.8万人,比2013年增加大约30%,其

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本文编号：739825