荧光素酶报告基因标记的HBV小鼠模型的建立

发布时间：2017-09-21 10:23

  本文关键词：荧光素酶报告基因标记的HBV小鼠模型的建立

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【摘要】：建立萤火虫荧光素酶(Fluc)为报告基因标记的乙型肝炎病毒(HBV)小鼠模型。通过水动力转染10μg质粒pGL3-CP-Fluc-HBV1.2分别导入C57BL/6和BALB/c小鼠肝细胞内,定期取血检测HBsAg和HBV-DNA水平,活体成像检测Fluc在小鼠的表达。在BALB/c小鼠中,血清HBsAg表达水平在转染后第1w内迅速升高,随后快速下降。而在C57BL/6小鼠中,HBsAg表达水平下降较缓慢。血清病毒滴度在转染后第1d平均达到3.89×104copy/ml,在第4d和第7d达到最高,分别为1.61×105和1.31×105copy/ml,随后开始下降,在转染的第70d仍维持在103 copy/ml以上。免疫组化检测C57BL/6小鼠肝脏HBcAg的表达,结果显示在转染后第3dHBcAg高水平表达,第135dHBcAg仍有表达,但表达水平降低。活体荧光成像实时检测小鼠肝脏Fluc,结果表明两组小鼠均能持续高水平表达Fluc,转染后第7周Fluc的表达量仍然超过106 photon/s。我们建立的报告基因标记的HBV小鼠模型能够稳定表达HBV标志物和Fluc,为进一步进行HBV的疫苗评价提供了基础。
【作者单位】： 中国人民解放军第一七五医院厦门大学附属东南医院输血科;
【关键词】： 乙型病毒性肝炎 动物模型 水动力转染 活体荧光成像
【基金】：国家自然科学基金项目(81102223) 南军军区医药卫生科研基金项目(12MA068;15MS105)
【分类号】：R-332;R512.62
【正文快照】： 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染严重影响人类的健康,它可引起急、慢性病毒性肝炎。急性感染后,有(5~10)%的成年人发展为持续感染,最终可以导致慢性肝炎、肝硬化和肝癌[1-2]。目前全球约有3.5亿乙型肝炎病毒慢性感染者[3],迄今为止,还无有效的药物能够完全治愈乙肝患，

本文编号：893942