巨片形吸虫病快速诊断胶体金免疫层析试条的研制与评价

发布时间：2017-09-28 16:00

  本文关键词：巨片形吸虫病快速诊断胶体金免疫层析试条的研制与评价

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【摘要】：目的建立快速、简便诊断巨片形吸虫病的胶体金免疫层析试条方法。方法提取巨片形吸虫总RNA,通过RT-PCR获得FgCL1-YN基因片段,并克隆入pET28a(+)表达载体,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达得到重组蛋白(r FgCL1-YN);将r FgCL1-YN和羊抗鼠IgG抗体分别包被于硝酸纤维素膜的适宜位置作为检测带和质控带,以胶体金标记抗人IgG4抗体的鼠单抗作为检测试剂,制备检测特异性IgG4型抗体的免疫层析试条。用该试条检测巨片形吸虫病患者(30份)、日本血吸虫病患者(15份)以及健康人(32份)血清,评价其诊断价值,同时用ELISA法进行平行检测作为对照。结果试条检测法的敏感性为100%(30/30),特异性为97.9%(46/47),总体符合率为98.7%(76/77)。ELISA法检测的敏感性、特异性和总体符合率分别100%(30/30)、100%(47/47)和100%(77/77)。试条法与ELISA法的敏感性、特异性和总体符合率,经四格表确切概率法检验,P值分别为1、0.5和0.5,全部大于0.05。显示,试条法与ELISA法检测巨片形吸虫病患者血清的结果高度一致。另外,试条法的检测时间为10min,血清用量低于10μL,且具较高的敏感度。结论以r FgCL1-YN建立的快速诊断胶体金免疫层析试条,检测巨片形吸虫病具有较高的诊断价值。
【作者单位】： 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所 卫生部寄生虫病病原与媒介生物学重点实验室心 世界卫生组织热带病合作中心;大理州血吸虫病防治研究所;益思美诠生物科技(上海)有限公司;宾川县血吸虫病防治站;
【关键词】： 巨片形吸虫病 组织蛋白酶L 免疫层析试条 ELISA 诊断
【基金】：上海市第四轮三年行动计划项目(GWIV-29)~~
【分类号】：R532.2
【正文快照】： The forth round of Three-Year Public Health Action Plan(2015-2017)巨片形吸虫病是由巨片形吸虫(Fasciolagigantica)感染引起的一种人兽共患寄生虫病[1-3]。2011年底,在云南省大理白族自治州宾川县暴发人体巨片形吸虫病,发病人数约30人,由于之前我国巨片形吸虫病多为散发,

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本文编号：936726