hTERT启动表达VacA基因的重组杆状病毒载体的构建

发布时间：2017-10-01 17:25

  本文关键词：hTERT启动表达VacA基因的重组杆状病毒载体的构建

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【摘要】：目的构建人端粒酶逆转录酶启动子(hTERT)调控的、携带幽门螺杆菌细胞空泡毒素A(Vacuolatingcytotoxin A,VacA)基因的选择性表达重组杆状病毒。方法应用酶切、连接方法将hTERT连接于杆状病毒穿梭质粒pFastBac~(TM)DUAL载体P10启动子序列之后,和SV40分别调控目的基因VacA的表达和终止;将重组穿梭质粒电转入DH10Bac~(TM)E.coli感受态细胞,经转座重组获得重组杆粒Bacmid-VacA。利用脂质体Cellfectin~汶将重组杆粒转染Sf9昆虫细胞,包装重组杆状病毒。结果应用PCR验证、双酶切分析、序列测定等方法验证重组质粒基因片段连接正确无突变,通过转座重组获得携带有VacA基因片段的重组杆粒。结论携带VacA基因的选择性复制重组杆粒成功构建。
【作者单位】： 江苏大学医学院;
【关键词】： 杆状病毒 空泡毒素A 人端粒酶逆转录酶启动子
【基金】：江苏省自然科学基金项目(KB20161345) 江苏省2014年度研究生课题(JGLX14_088)
【分类号】：R532.21
【正文快照】： 血吸虫病是由于血吸虫寄生于人体而引起的疾病,在我国主要流行于长江流域及其以南的省区,目前主要治疗方法是药物治疗。本课题组设想通过昆虫杆状病毒表达系统将可使细胞空泡样变性的细胞空泡毒素A(Vacuolatingcytotoxin A,Vac A)转入血吸虫体内,并在其中表达,最终破坏虫体,达，

本文编号：954737