猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪A型轮状病毒多重RT-PCR方法的建立及其应用

发布时间：2017-10-12 01:28

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【摘要】：为了建立一种能够同时检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪A群轮状病毒(RVA)的敏感、特异的多重RT-PCR(mRT-PCR)方法,本试验分别针对PEDV和TGEV的N基因、RVA的VP7基因设计了4对引物(其中针对PEDV N基因的引物为内、外2对),结合mRT-PCR和PEDV的套式RT-PCR(nRTPCR),建立了检测PEDV、TGEV和RVA的mRT-PCR方法。mRT-PCR能够同时扩增出针对3种病毒的预期大小的目的核苷酸片段,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒及猪圆环病毒2型等病毒无交叉反应;可以检测到PEDV、TGEV和RVA的最低核酸浓度分别为16.07、803.9和321.5μg/L。应用mRT-PCR检测了31份腹泻仔猪的血清、肛拭子或小肠组织,其中PEDV、TGEV与RVA的阳性率分别为61.29%、6.45%和25.81%,并检测到了PEDV与RVA或TGEV双重感染及PEDV、TGEV和RVA三重感染的样品。在检测临床样品时,mRT-PCR和单项RT-PCR检出PEDV、TGEV和RVA的符合率分别为96.77%、93.54%和93.54%。上述结果表明,mRTPCR能够快速鉴别检测PEDV、TGEV和RVA 3种病毒,PEDV是引起当前仔猪腹泻的主要病原。
【作者单位】： 河北农业大学动物医学院;
【关键词】： 猪流行性腹泻病毒 猪传染性胃肠炎病毒 猪A群轮状病毒 多重RT-PCR
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31372441) 河北省科技计划资助项目(13226603D-1(2013)-X) 河北省生猪产业技术体系疫病控制专项资助项目
【分类号】：S852.65
【正文快照】： Establishment and application of a multiplex reverse transcription-PCR for detec-ting porcine epidemic diarrhea virus,porcine transmissible gastroenteritis virusand porcine group A rotavirusLI Li-min,ZHU Wei-xia,WANG Xiao-bo,WEI Yan-qiu,ZHANG He,ZHANG Yi

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本文编号：1015897