猪链球菌2型实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

发布时间：2017-10-15 20:14

  本文关键词：猪链球菌2型实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

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【摘要】：试验根据猪链球菌2型荚膜多糖(CPS)抗原设计CPS2J基因特异性引物,建立猪链球菌2型实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法的标准曲线为y=-3.073x+36.87,r=0.995,熔解曲线只有单一的特异峰。敏感性试验显示,该方法可以检测出模板最低浓度为1.0×101拷贝/μL,是普通PCR的10倍;特异性试验显示,对猪链球菌2型具有良好的特异性,能够区分其他血清型猪链球菌和其他细菌;重复性试验变异系数为0.37%~0.63%,均低于2.5%。临床检测显示该方法的敏感性明显高于常规PCR方法和细菌分离的方法。以上结果表明,本研究建立的方法敏感性高、特异性强、重复性好,有利于对猪链球菌2型的快速检测。
【作者单位】： 青岛农业大学动物科技学院;山东省农业科学院畜牧兽医研究所;山东滨州沃华生物工程有限公司;
【关键词】： 猪链球菌型 实时荧光定量PCR 敏感性 特异性 重复性
【基金】：泰山学者特聘专家工程经费 山东省现代农业产业技术体系(SDAIT) 山东省农业科学院重大科技成果培育计划(2014CGPY04);山东省农业科学院青年科研基金(2015YQN51);山东省农业科学院农业科技创新工程项目(CXGC2016B14) 山东省农业重大应用技术创新项目 山东省自然科学基金(ZR2015YL078)
【分类号】：S852.611
【正文快照】： 猪链球菌(Streptococcus suis)是一种危害严重的人兽共患病病原菌,临床上以引起猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎、败血症和突发死亡等症状为主。至今,已鉴定出35个血清型(1~34型及1/2型)[1]。引起猪发病的主要血清型是1、2、7、9型,其中2型不仅致病性强,而且流行较为广泛。1991年

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本文编号：1038477