蛋鸡感染基因Ⅶ型NDV后输卵管组织中主要细胞因子及趋化因子mRNA的表达变化

发布时间：2017-10-16 05:40

  本文关键词：蛋鸡感染基因Ⅶ型NDV后输卵管组织中主要细胞因子及趋化因子mRNA的表达变化

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【摘要】：新城疫是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起的禽类一种高度接触性传染病,在家禽养殖业造成巨大的经济损失。NDV感染产蛋鸡能造成输卵管充血,出血,引起输卵管的炎症,从而导致蛋鸡输卵管的机能障碍。新城疫发病蛋鸡群产蛋率降低40%-60%,产软壳蛋,沙壳蛋的的几率增加。基因VII型NDV是在亚洲地区流行的主要基因型,有关基因VII型NDV病原学特点的研究很多,但有关NDV感染蛋鸡后输卵管组织中与炎症相关的细胞因子及趋化因子的表达研究很少。因此,本研究主要检测NDV感染产蛋鸡后输卵管组织中细胞因子和趋化因子的表达,为NDV感染导致蛋鸡输卵管损伤的分子机理研究提供实验数据。实验结果如下:1.用基因VII型NDV人工感染非免健康蛋鸡,感染后观察发病情况和临床症状,感染后不同时间扑杀病鸡,分别采取输卵管伞部、膨大部、峡部、子宫部和阴道部组织用于进一步检测。HN蛋白切片染色证明,NDV病毒能在输卵管各部位复制,5个部位HN蛋白染色都呈阳性。病毒在伞部、膨大部、峡部感染的细胞主要是固有层腺上皮细胞,零星的感染粘膜下层细胞。在子宫部,病毒主要感染粘膜下层细胞,零星感染固有层细胞。在阴道部病毒主要感染粘膜上皮细胞。2.采用Real-time RT-PCR检测输卵管膨大部和子宫部细胞因子IL-2,IL-6,IL-1β,IFN-α,IFN-βm RNA和趋化因子CXCLi1、CXCLi2、CCR5 m RNA在不同感染时间的表达变化。IL-2,IL-6,IL-1β,IFN-βm RNA基因在输卵管膨大部和子宫部出现了不同程度的上调,IL-2在膨大部上调的倍数最高,为正常的137倍,IFN-β上调倍数为95倍,IL-1β上调了16倍,而IFN-α基因表达出现下调的趋势。CXCLi1、CXCLi2、CCR5 m RNA在2个部位都表现出上调的趋势,且膨大部的上调趋势最明显。综上所述,基因VII型NDV感染非免蛋鸡后病毒能在输卵管组织组织中复制,引起输卵管组织炎性因子释放和严重病理损伤。
【关键词】：基因VII型NDV 输卵管组织 HN蛋白 细胞因子 趋化因子 蛋鸡
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.31
【目录】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-9
• 文献综述9-13
• 第一章 新城疫病毒诱导机体免疫反应的研究进展9-13
• 1.1 新城疫病毒的概述9-10
• 1.1.1 病原学9-10
• 1.1.2 临床症状及其病理变化10
• 1.2 NDV诱导的免疫应答10-12
• 1.2.1 NDV感染诱导的先天免疫应答10-11
• 1.2.2 NDV诱导的抗体反应11
• 1.2.3 NDV诱导的细胞免疫11-12
• 1.3 NDV对蛋鸡输卵管的致病作用12
• 1.4 本研究的目的及意义12-13
• 试验研究13-21
• 第二章 蛋鸡感染基因VII型NDV后输卵管组织中主要细胞因子及趋化因子MRNA的表达变化13-21
• 2.1 材料13-14
• 2.1.1 毒株13
• 2.1.2 试验动物13
• 2.1.3 主要试剂13-14
• 2.1.4 主要仪器14
• 2.2 方法14-16
• 2.2.1 NDV 增殖及 EID50 测定14
• 2.2.2 蛋鸡人工感染基因VII型NDV临床症状观察14
• 2.2.3 新城疫感染鸡后输卵管组织中病毒的检测14-15
• 2.2.4 Real-time RT-PCR15-16
• 2.3 结果16-19
• 2.3.1 感染蛋鸡临床症状及病变观察16
• 2.3.2 新城疫病毒在输卵管的分布情况16-17
• 2.3.3 细胞因子IL-2，IL-6，，IL-1β，IFN-α，IFN-β 基因在输卵管膨大部和子宫部表达变化17-18
• 2.3.4 趋化因子基因CXCLi1，CXCLi2， CCR5在膨大部和子宫部的表达变化18-19
• 2.4 讨论19-20
• 2.5 小结20-21
• 结论21-22
• 参考文献22-26
• 致谢26-27
• 作者简介27

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本文编号：1040940