猪伪狂犬病毒和猪圆环病毒2型TaqMan-MGB双重荧光定量PCR检测方法的建立及应用

发布时间：2017-10-23 21:32

  本文关键词：猪伪狂犬病毒和猪圆环病毒2型TaqMan-MGB双重荧光定量PCR检测方法的建立及应用

  更多相关文章： 猪伪狂犬病毒 猪圆环病毒TaqMan-MGB 双重荧光定量PCR

【摘要】：参照GenBank中猪伪狂犬病毒(PRV)gE基因以及猪圆环病毒2型(PCV2)中ORF2特异性序列,设计特异引物和TaqMan-MGB探针,通过优化反应条件,建立了同时检测PRV野毒株和猪圆环病毒(PCV2)的双重荧光定量PCR检测方法,并验证该方法的特异性、敏感性、重复性。结果表明,该方法检测PRV和PCV2灵敏度分别可达2.23×101、4.5×102拷贝/μL,均比常规PCR检测方法高100倍;同时检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、均为阴性,无交叉反应;对30份疑似病料进行检测并与普通PCR进行比较,结果显示,二者检测PRV的总符合率为96.67%,检测PCV2的总符合率为93.33%。本试验建立的TaqMan-MGB双重荧光定量PCR检测方法可同时对PRV野毒株和PCV2进行早期快速诊断,可应用于病原学监测,流行病学调查等。
【作者单位】： 福建省农业科学院畜牧兽医研究所;福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心;福建省农业科学院生物技术研究所;
【关键词】： 猪伪狂犬病毒 猪圆环病毒TaqMan-MGB 双重荧光定量PCR
【基金】：福建省农业科学院青年科技人才创新基金资助项目(2010QC-13) 省农业科学院重大专项资助项目(ZDZX-1302)
【分类号】：S852.651
【正文快照】： 福州350013)*Corresponding author,E-mail:chensy58@163.com猪伪狂犬病毒(pseudorabiesvirus,PRV)可引起猪多种急性传染病,以发热和脑脊髓炎为主要特征,新生仔猪出现神经症状,妊娠母猪表现为流产、死胎、木乃伊胎等[1-2]。成年猪呈现典型的潜伏感染且终生带毒,一定条件下潜伏

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 李明凤;魏战勇;郭显坡;贾艳艳;陈红英;王学兵;崔保安;;猪伪狂犬病毒SYBR-GreenⅠ实时定量PCR检测方法的建立[J];河南农业大学学报;2009年03期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 刘俊;王琴;范学政;徐璐;赵启祖;黄伟;汤波;沙莎;周远成;陈蕾;邹兴启;;猪瘟病毒野毒株TaqMan-MGB荧光定量PCR鉴别方法的建立与应用[J];中国农业科学;2009年12期

2 刘园园;吴晖;肖性龙;贾峗;吴斌;余以刚;;猪伪狂犬病病毒TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立及应用[J];中国畜牧兽医;2009年04期

3 卢亦愚;严菊英;冯燕;徐昌平;史雯;茅海燕;;TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR技术快速检测H5亚型禽流感病毒[J];Virologica Sinica;2006年05期

4 ;[J];;年期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 齐雪峰;程安春;汪铭书;杨晓燕;郭宇飞;陈孝跃;;基于TaqMan-MGB 探针FQ-PCR对鸭瘟弱毒苗在皮下注射及其同居鸭体内侵染、增殖和排泄规律研究[A];第三届第八次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集[C];2006年

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 潘爱珍;TaqMan-MGB荧光定量PCR用于结核分枝杆菌异烟肼耐药的研究[D];中国疾病预防控制中心;2010年

，

本文编号：1085490