四川地区HPS与CSFV、PRV混合感染调查及HPS四川分离株质粒介导的β-内酰胺类耐药基因检测
本文关键词:四川地区HPS与CSFV、PRV混合感染调查及HPS四川分离株质粒介导的β-内酰胺类耐药基因检测
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【摘要】:副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis, HPS)是正常猪群上呼吸道的一种共栖菌,但其在特定条件下可侵入机体并引起全身性疾病,是目前影响养猪业的重要细菌病之一。本研究对四川省副猪嗜血杆菌、猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus, CSFV)和伪狂犬病毒(Pseudorabies Virus,PRV)病原混合感染进行检测,并对副猪嗜血杆菌四川分离株进行p-内酰胺类抗生素的药敏实验和质粒介导的p-内酰胺类耐药基因检测,为四川地区副猪嗜血杆菌病的防控提供科学依据。主要研究结果如下:1.四川地区HPS与CSFV、PRV混合感染调查对四川18个不同地区的75份分离出副猪嗜血杆菌且临床症状表现为疑似感染CSFV和PRV的病猪组织,分别提取组织RNA和DNA进行RT-PCR和PCR检测。检测结果显示,HPS和CSFV混合感染率为37.3%(28/75);HPS和PRV混合感染率为16.0%(12/75);HPS与CSFV和PRV混合感染率为9.3%(7/75)。结果表明四川地区这三种病的交叉混合感染比较严重。2.HPS四川分离株质粒介导的β-内酰胺类耐药基因检测分别采用纸片法和PCR方法,对97株HPS四川分离株的5种p-内酰胺类药物耐药情况以及5种质粒介导的p-内酰胺类耐药基因携带情况进行检测。结果表明,分离株中耐药菌株比例高达86.6%(84/97);分离株对氨苄西林、阿莫西林、青霉素、头孢噻肟、先锋霉素V的耐药率分别为63.9%(62/97)、56.7%(55/97)、74.2%(72/97)、37.1%(36/97)、29.9%(29/97),且多重耐药情况比较严重;86.6%(84/97)分离株的质粒携带至少一种耐药基因,基因TEM、SHV、CTX、OXA、DHA的检出率分别为57.7%(56/97)、33.0%(32/97)、17.5%(17/97)、19.6%(19/97)、2.1%(2/97),有32株分离株携带2-3种耐药基因;耐药基因型和耐药表型的符合率为88.1%(74/84)。结果表明,副猪嗜血杆菌四川分离株对p-内酰胺类抗生素严重耐药,其质粒介导的p-内酰胺类耐药基因携带率较高。此外,耐药基因型和表型的高符合率,表明通过检测耐药基因型来初步确定耐药菌株切实可行。
【关键词】:副猪嗜血杆菌 混合感染 质粒 β-内酰胺类抗生素 耐药基因
【学位授予单位】:四川农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:S858.28
【目录】:
- 中文摘要4-5
- ABSTRACT5-7
- 缩略词表7-11
- 第一章 文献综述11-19
- 1 副猪嗜血杆菌病的研究11-13
- 1.1 病原学11
- 1.2 流行病学11-12
- 1.3 临床症状与病理变化12
- 1.4 诊断方法12
- 1.5 防治12-13
- 2 HPS与其他疾病混合感染研究13-15
- 2.1 HPS与CSFV的混合感染研究13
- 2.2 HPS与PRV的混合感染研究13-14
- 2.3 HPS与CSFV、PRV的混合感染研究14
- 2.4 HPS与其他病毒的混合感染研究14-15
- 2.5 HPS与细菌的混合感染研究15
- 3 HPS耐药性研究15-18
- 3.1 HPS药物敏感性研究15-16
- 3.2 HPS耐药基因研究16-18
- 4 本研究的目的与意义18-19
- 第二章 四川地区HPS与CSFV、PRV混合感染情况调查19-29
- 1 实验材料19-20
- 1.1 病料来源19
- 1.2 主要试剂19-20
- 1.3 主要设备20
- 2 实验方法20-22
- 2.1 HPS与CSFV混合感染调查20-21
- 2.2 HPS与PRV混合感染调查21-22
- 3 实验结果22-25
- 3.1 CSFV的RT-PCR鉴定结果22-23
- 3.2 PRV的PCR鉴定结果23
- 3.3 HPS与CSFV、PRV混合感染情况23-25
- 4 讨论25-29
- 4.1 CSFV检测结果分析25-26
- 4.2 PRV检测结果分析26-27
- 4.3 混合感染情况分析27-29
- 第三章 四川地区HPS质粒介导的β-内酰胺类耐药基因检测29-41
- 1 实验材料29-30
- 1.1 菌株29
- 1.2 主要试剂29-30
- 1.3 主要培养基制备30
- 1.4 主要仪器30
- 2 实验方法30-32
- 2.1 菌株复苏30-31
- 2.2 β-内酰胺类抗生素敏感性检测(纸片法)31
- 2.3 质粒小提31
- 2.4 质粒耐药基因PCR检测31-32
- 3 实验结果32-39
- 3.1 耐药表型检测结果32-35
- 3.2 质粒介导的β-内酰胺类耐药基因检测结果35-38
- 3.3 多重耐药情况38-39
- 3.4 耐药表型与基因型符合情况39
- 4 讨论39-41
- 第四章 结论41-42
- 参考文献42-52
- 致谢52-53
- 附录一 副猪嗜血杆菌药敏结果和耐药基因检测结果53-57
- 攻读学位期间发表的学术论文57
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 代军;刘君;黄倩;柳瑶;周鹏;黄毅;谭晓婷;文心田;文翼平;曹三杰;黄小波;伍锐;;副猪嗜血杆菌分型血清制备及其四川地区流行病学[J];中国兽医学报;2016年01期
2 钟敏;胡艳;苏州;钟云平;郭礼荣;邱光忠;;副猪嗜血杆菌的分离鉴定及血清型分析[J];江西畜牧兽医杂志;2015年06期
3 白帅州;曾文斌;刘悦欣;左明开;幸文定;陶政;王萍;;副猪嗜血杆菌病的诊断[J];畜牧与兽医;2015年11期
4 王婧;姜玲玲;史开志;余波;尚以顺;;猪繁殖与呼吸综合征及副猪嗜血杆菌病混合感染的诊治[J];贵州畜牧兽医;2015年05期
5 范锦戴;陈慧敏;马保华;罗敏瑜;曾志良;马静云;;副猪嗜血杆菌纳米PCR检测方法的建立[J];中国兽医科学;2015年10期
6 唐建华;陈晓英;拉巴次旦;吴金措姆;马兴斌;;拉林公路沿线藏猪副猪嗜血杆菌血清抗体流行病学调查[J];养猪;2015年05期
7 冷冬;;猪瘟病毒简介[J];湖北畜牧兽医;2015年10期
8 冶贵生;张爽;张晓芬;贾跃宁;邹勇;;A型产气荚膜梭菌四环素耐药基因的PCR检测[J];黑龙江畜牧兽医;2015年16期
9 方志超;刘书超;林雅;简燕娟;韩冠双;吕朋沙;程方俊;;鸭源致病性大肠杆菌四环素类耐药基因检测[J];中国兽医杂志;2015年07期
10 米丁丹;张艳禾;张万江;谢芳;李刚;王春来;李和平;;副猪嗜血杆菌临床分离株耐药性与耐药机制的研究[J];中国预防兽医学报;2015年07期
,本文编号:1107263
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