重组山羊痘病毒通用转移载体的构建
本文关键词:重组山羊痘病毒通用转移载体的构建
【摘要】:为了便于山羊痘病毒(goat pox virus,GPV)活载体疫苗的研究,本试验拟构建能够用于GPV重组的通用转移载体。用DNA合成和PCR方法构建含有启动子p7.5和p11的质粒pTKpp,以绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)为报告基因,构建含有p7.5/p11-GFP表达盒的重组质粒pTKpp-GFP和通用转移质粒pTKpgigp,转染已感染GPV的羔羊睾丸(lamb testis,LT)细胞,观察GFP的表达情况;同时在pTKpgigp中插入外源基因FMDVVP1,构建重组转移质粒pTKpgigp-VP1,与GPV共转染LT细胞,产生并筛选重组GPV,验证外源基因的表达情况。结果显示,重组质粒中的启动子p7.5和p11能够启动GFP的表达;以重组转移质粒pTKpgigp-VP1进行的GPV重组成功获得了rGPV。最终证明通用转移载体pTKpgigp构建成功,能够用于重组GPV的相关研究。
【作者单位】: 宁夏大学农学院;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室;
【关键词】: 山羊痘病毒 转移载体 重组 tk基因
【基金】:宁夏大学自然科学研究基金资助项目(ZR1440)
【分类号】:S852.654
【正文快照】: 随着DNA重组技术的深入应用,以活病毒作为基因表达和转运系统取得了快速发展,研究人员先后构建了痘苗病毒、禽痘病毒、疱疹病毒、腺病毒和羊痘病毒(good pox virus,GPV)等的活载体,其中痘苗病毒活载体的应用最为成熟[1-2]。这些病毒载体用途广泛,主要集中在以下领域:病毒分子
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,本文编号:1122020
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